細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中的化學(xué)染色

1. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中細(xì)胞經(jīng)jia基綠一呱咯寧混合液處理后，其中的 DNA 和 RNA 出現(xiàn)不同的呈色反應(yīng)，一般認(rèn)為這是由于帶有負(fù)電荷的核酸對(duì)堿性染料呱咯寧和jia基綠具有親和力，掃描電鏡和透射電鏡的區(qū)別，且這兩種染料的作用有選擇性，jia基綠染高聚分子的 DNA 呈藍(lán)綠色，呱咯寧染低聚分子的 RNA 呈紅色。由此對(duì)細(xì)胞中的 DNA 和 RNA 進(jìn)行定位、定性、和定量分析。

2. 由于不同的蛋白質(zhì)分子所帶的堿性和酸性基團(tuán)的數(shù)目不同，在 pH 值不同的溶液中，蛋白質(zhì)分子所帶的凈電荷多少不同。如在生理?xiàng)l件下，整個(gè)蛋白質(zhì)所帶負(fù)電荷多，則為酸性蛋白質(zhì)；帶正電荷多，青海掃描電鏡，則為堿性蛋白質(zhì)。據(jù)此，可將標(biāo)本經(jīng)三氯醋酸處理提出核酸后，用不同 pH 值的固綠染液分別染色，sem掃描電鏡，使細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中細(xì)胞內(nèi)的酸性蛋白和堿性蛋白質(zhì)顯示出來。

3. 過氧化物酶能把許多胺類氧化為有色化合物，用聯(lián)ben胺處理標(biāo)本，細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中細(xì)胞內(nèi)的過氧化物酶能把聯(lián)ben胺氧化為藍(lán)色的聯(lián)ben胺藍(lán)，進(jìn)而變?yōu)樽厣a(chǎn)物，因而可以根據(jù)顏色反應(yīng)來判定過氧化物酶的有無或多少。

4. 組織、細(xì)胞的多糖、粘多糖及粘蛋白等都可用 PAS 法來顯示，其化學(xué)基礎(chǔ)是利用guo碘酸的氧化作用，打開碳鏈形成醛，生成的醛基與 Schiff 試劑中的無色品紅反應(yīng)形成紫紅色化合物。

TTC染色是TTC和活細(xì)bao線粒體內(nèi)的琥珀酸脫氫酶反應(yīng)，生成紅色的甲月贊，用來表示細(xì)胞的活力。配制多為2％，染色要避光，37度條件下，它是評(píng)價(jià)腦缺血損傷常用的指標(biāo)。

   TTC（2，3，5—氯化三苯j(luò)i四氮唑）是脂溶性光敏感復(fù)合物，1894年剛開始合成用來檢測(cè)種子的生存能力，1958年開始用來染色檢測(cè)哺乳動(dòng)物組織的缺血梗塞。它是呼吸鏈中吡定—核苷結(jié)構(gòu)酶系統(tǒng)的質(zhì)子受體，與正常組織中的脫氫酶反應(yīng)而呈紅色，而缺血組織內(nèi)脫氫酶活性下降，不能反應(yīng)，透射電鏡，故不會(huì)產(chǎn)生變化呈蒼白。

   TTC可以被活細(xì)bao中的具有還原活性的酶(好像主要是琥珀酸脫氫酶)還原生成粉紅色的還原產(chǎn)物，所以活組zhi部分呈現(xiàn)粉紅色，而si亡的細(xì)胞的還原酶的活力已經(jīng)消失，因此TTC不能被還原，所以si亡的組織呈現(xiàn)白色。

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