微生物限度檢查

微生物計數(shù)法系用于能在有氧條件下生長的嗜溫細菌和真菌的計數(shù)。

   當(dāng)本法用于檢查非無菌制劑及其原、輔料等是否符合相應(yīng)的微生物限度標(biāo)準(zhǔn)時，應(yīng)按下述規(guī)定進行檢驗，包括樣品的取樣量和結(jié)果的判斷等。除另有規(guī)定外，微生物檢測，本法不適用于活菌制劑的檢查。

   微生物計數(shù)試驗環(huán)境應(yīng)符合微生物限度檢查的要求。檢驗全過程必須嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作，防止再污染，防止污染的措施不得影響供試品中微生物的檢出。單向流空氣區(qū)域、工作臺面及環(huán)境應(yīng)定期進行監(jiān)測。

   如供試品有抗jun活性，實驗室微生物檢測，應(yīng)盡可能去除或中和。供試品檢查時，若使用了中和劑或滅活劑，空氣微生物檢測，應(yīng)確認其有效性及對微生物無毒性。

   供試液制備時如果使用了表面活性劑，應(yīng)確認其對微生物無毒性以及與所使用中和劑或滅活劑的相容性。

抑菌效力
抑菌劑效力可能受試驗用容器特征的影響，如容器的材質(zhì)、性狀、體積及封口的方式等。因此，只要供試品每個包裝容器的裝量足夠試驗用，同時容器便于按無菌操作技術(shù)接入試驗菌液、混合及取樣等，一般應(yīng)將試驗菌直接接種于供試品原包裝容器中進行貯存。若因供試品的性狀或每個容器裝量等因素需將供試品轉(zhuǎn)移至無菌容器時，該容器的材質(zhì)不得影響供試品的特性（如吸附作用），特別應(yīng)注意不得影響供試品的PH，PH對抑菌劑的活性影響很大，同時容器的口徑大小應(yīng)便于供試品的進出及混勻。

接種大腸埃希菌、金黃色球菌、銅綠假單胞菌的新鮮培養(yǎng)物至胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基中，30～35℃培養(yǎng)18～24小時；接種白色的新鮮培養(yǎng)物至沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基中，20～25℃培養(yǎng)24～48小時。上述培養(yǎng)物用0.9%無菌氯化鈉溶液制成每1ml含菌數(shù)為50～100cfu的菌懸液。接種黑曲霉的新鮮培養(yǎng)物至沙氏葡萄糖瓊脂斜面培養(yǎng)基中，食品微生物檢測，20～25℃培養(yǎng)5～7天，加入3～5ml含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的0.9%無菌氯化鈉溶液，將孢子洗脫。然后，采用適宜方法吸出孢子懸液至無菌氯化鈉溶液制成每1ml含孢子數(shù)50～100cfu的孢子懸液。

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