PCR實(shí)驗(yàn)室注意事項(xiàng)——標(biāo)本制備區(qū)

為避免樣本間的交叉污染，加入待測(cè)核酸后，必須蓋好含反應(yīng)混合液的反應(yīng)管。對(duì)具有潛在危險(xiǎn)性的材料，必須在生物安全柜內(nèi)開蓋，并有明確的樣本處理和滅活程序。

PCR實(shí)驗(yàn)室通風(fēng)系統(tǒng)及壓力控制

PCR實(shí)驗(yàn)室并沒有嚴(yán)格的凈化要求，但是為避免各個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)域交叉污染的可能性，實(shí)驗(yàn)室設(shè)備哪家好，宜采用全送全排的氣流組織形式，嚴(yán)格控制送、排風(fēng)的比例以保證各實(shí)驗(yàn)區(qū)的壓力要求。

PCR實(shí)驗(yàn)室各區(qū)功能及主要設(shè)備

擴(kuò)增區(qū)：主要進(jìn)行DNA擴(kuò)增。此外，已制備的DNA模板 (來(lái)自樣品制備區(qū))的加入和主反應(yīng)混合液(來(lái)自試劑準(zhǔn)備區(qū))制備成反應(yīng)混合液等也可在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行。本區(qū)主要設(shè)備有：擴(kuò)增儀、冰箱、離心機(jī)、加樣器等。

PCR實(shí)驗(yàn)室布局

PCR實(shí)驗(yàn)室原則上為試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣品制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)和擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)四個(gè)單獨(dú)的工作區(qū)域并設(shè)有專用走廊，各工作區(qū)域應(yīng)設(shè)緩沖間，工作區(qū)與緩沖間宜安裝連鎖裝置。

PCR實(shí)驗(yàn)室布局

不同功能的工作區(qū)應(yīng)是分隔獨(dú)立的，各工作區(qū)有明顯的標(biāo)志，不能直通，實(shí)驗(yàn)室設(shè)備生產(chǎn)廠家，如果緊密相連，需安裝物品傳遞窗。前兩區(qū)為擴(kuò)增前區(qū)，后兩區(qū)為擴(kuò)增后區(qū)，擴(kuò)增前區(qū)與擴(kuò)增后區(qū)應(yīng)嚴(yán)格分開。

PCR實(shí)驗(yàn)室注意事項(xiàng)——擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)

用過的吸頭也必須放至1 mol/L HCl中浸泡后再放到垃圾袋中按程序處理，實(shí)驗(yàn)室設(shè)備儀器，如焚燒。由于本區(qū)有可能會(huì)用到某些可致基因突變和有毒物質(zhì)，故應(yīng)當(dāng)注意實(shí)驗(yàn)人員的安全防護(hù)。

PCR實(shí)驗(yàn)室工作基本原則

工作結(jié)束后，必須立即對(duì)工作區(qū)進(jìn)行清潔。工作區(qū)的實(shí)驗(yàn)臺(tái)表面應(yīng)當(dāng)可耐受諸如化學(xué)物質(zhì)的消毒清潔作用。實(shí)驗(yàn)臺(tái)表面的紫外照射應(yīng)當(dāng)方便有效。

PCR實(shí)驗(yàn)室注意事項(xiàng)

幾個(gè)區(qū)域的大小設(shè)置情況，試劑準(zhǔn)備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)，空間可以相對(duì)小一些，合肥實(shí)驗(yàn)室設(shè)備，樣品制備區(qū)要放置生物安全柜和低溫冰箱，空間應(yīng)大一些。

PCR實(shí)驗(yàn)室注意事項(xiàng)——擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)

用過的吸頭也必須放至1 mol/L HCl中浸泡后再放到垃圾袋中按程序處理，如焚燒。由于本區(qū)有可能會(huì)用到某些可致基因突變和有毒物質(zhì)，故應(yīng)當(dāng)注意實(shí)驗(yàn)人員的安全防護(hù)。

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