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變異鏈球菌(Streptococcusmutans)是一種在口腔中發(fā)現(xiàn)的細(xì)菌,與齲齒的形成有關(guān)。它是一種革蘭陽(yáng)性球菌,常以成對(duì)或短鏈狀排列。在胰蛋白胨培養(yǎng)基中和含有95%氮?dú)饧?%二氧化碳混合氣體的環(huán)境下生長(zhǎng)良好。對(duì)于變異鏈球菌的培養(yǎng),通常使用TSA+5%脫纖維蛋白羊血(血瓊脂平板)作為培養(yǎng)基。在這種培養(yǎng)基上,變異鏈球菌的菌落特征為較?。ㄖ睆郊s1mm)、灰白色、凸起、邊緣不齊、干燥、有α溶血環(huán)。在選擇培養(yǎng)基時(shí),需要考慮培養(yǎng)基的pH值、營(yíng)養(yǎng)成分、氧氣需求和抑制劑等因素,以確保目標(biāo)細(xì)菌能夠在抑制雜菌的同時(shí)良好生長(zhǎng)。例如,改良愛(ài)德華培養(yǎng)基(Edwardmodifiedmedium)是一種常用的培養(yǎng)基,它含有血液、血清或其它營(yíng)養(yǎng)成分,適合于培養(yǎng)對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌,如鏈球菌。在實(shí)驗(yàn)室中,變異鏈球菌的培養(yǎng)和鑒定是一個(gè)多步驟的過(guò)程,包括接種、培養(yǎng)、觀察菌落特征、進(jìn)行生化試驗(yàn)和藥敏分析等。通過(guò)這些步驟,可以準(zhǔn)確地識(shí)別和鑒定變異鏈球菌,從而為臨床診斷提供依據(jù)。哥倫比亞肉湯能夠支持包括細(xì)菌、酵母和霉菌在內(nèi)的多種微生物的生長(zhǎng),尤其適合培養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)要求高的微生物。NGA培養(yǎng)皿
TGE肉湯(TryptoneGlucoseExtractBroth),又名胰蛋白胨葡萄糖提取物肉湯,是一種用于微生物培養(yǎng)的液體培養(yǎng)基。這種培養(yǎng)基通常含有胰蛋白胨、牛肉浸粉和葡萄糖,以及作為指示劑的TTC(三苯基四氮唑氯化物)。TGE肉湯(含TTC)的主要用途和特點(diǎn)如下:1.**用途**:TGE肉湯主要用于水、牛奶和乳制品中異養(yǎng)細(xì)菌的計(jì)數(shù)。它適用于細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定,也可用于檢測(cè)乳品中的耐熱細(xì)菌。2.**成分**:典型的TGE肉湯配方包含胰蛋白胨、牛肉浸粉、葡萄糖和TTC。胰蛋白胨和牛肉浸粉提供碳氮源、維生素和生長(zhǎng)因子,葡萄糖作為可發(fā)酵的糖類(lèi)提供能量。3.**pH值**:TGE肉湯的pH值通常調(diào)節(jié)在7.0±0.2(25℃)。4.**制備方法**:將TGE肉湯的干粉溶解在蒸餾水中,加熱煮沸以幫助成分溶解,然后進(jìn)行高壓滅菌。5.**使用**:通常取一定量的培養(yǎng)基加熱溶解于蒸餾水中,分裝后進(jìn)行高壓滅菌,然后用于微生物的培養(yǎng)。6.**指示劑**:TTC作為指示劑,當(dāng)細(xì)菌代謝時(shí),TTC會(huì)被還原成紅色的三苯基甲烷,從而便于觀察細(xì)菌的生長(zhǎng)情況。7.**保存條件**:未開(kāi)封的TGE肉湯通常在室溫下避光保存,開(kāi)封后應(yīng)旋緊瓶蓋,避免吸潮結(jié)塊,并根據(jù)存放條件適當(dāng)延長(zhǎng)保存期。
PALCAM瓊脂基礎(chǔ)是一種專(zhuān)門(mén)設(shè)計(jì)用于分離和培養(yǎng)單核細(xì)胞增生李斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)的選擇性培養(yǎng)基。除了李斯特氏菌,它也可以用來(lái)分離其他類(lèi)型的細(xì)菌,盡管其選擇性成分主要針對(duì)李斯特氏菌。**特點(diǎn)**:1.**成分**:PALCAM瓊脂基礎(chǔ)包含酪蛋白胰酶消化物、心胰酶消化物、肉胃酶消化物、玉米淀粉、酵母浸膏、甘露醇、七葉苷、檸檬酸鐵銨、葡萄糖、氯化鋰、瓊脂和酚紅等成分。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),為細(xì)菌提供適宜的生長(zhǎng)環(huán)境。3.**選擇性**:氯化鋰和抗生物質(zhì)添加劑(如鹽酸吖啶黃素、硫酸多粘菌素B和頭孢他啶)能夠抑制革蘭氏陰性菌和大多數(shù)革蘭氏陽(yáng)性菌,特別是非李斯特氏菌的生長(zhǎng)。4.**應(yīng)用**:主要用于食品、水和污水樣本中單核細(xì)胞增生李斯特氏菌的選擇性分離培養(yǎng)。5.**結(jié)果觀察**:李斯特氏菌在PALCAM瓊脂上生長(zhǎng)時(shí),會(huì)水解七葉苷生成黑色的6,7-二羥基香豆素,形成灰綠色菌落,中心凹陷,周?chē)泻谏h(huán)。盡管PALCAM瓊脂基礎(chǔ)主要用于李斯特氏菌的分離,但某些非李斯特氏菌,如葡萄球菌和腸球菌等,偶爾也能在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng),利用甘露醇產(chǎn)酸使菌落和其周?chē)呐囵B(yǎng)基呈黃色。
DCR培養(yǎng)基是一種用于植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基,它支持植物細(xì)胞、組織的生長(zhǎng)和發(fā)育。以下是DCR培養(yǎng)基的一些關(guān)鍵特點(diǎn)和配制方法:1.**配方組成**:-包含大量元素(如硝酸銨、硝酸鉀、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、氯化鈣等)、微量元素(如硼酸、硫酸錳、硫酸鋅、硫酸銅、碘化鉀等)、鐵鹽(如硫酸亞鐵、EDTA二鈉)和有機(jī)物(如鹽酸硫胺素、鹽酸吡哆醇、煙酸、甘氨酸、肌醇)。2.**配制方法**:-稱(chēng)取培養(yǎng)基粉末1428.68mg/L,溶于1000ml蒸餾水或去離子水中。-加入1ml/L的1000×鈣濃縮液。-使用NaOH或HCl調(diào)節(jié)pH至5.8-6.2。-115℃高壓滅菌30分鐘。3.**用途**:-主要用于植物組織培養(yǎng),包括細(xì)胞、組織的生長(zhǎng)和發(fā)育。4.**保存條件**:-2-8°C保存。5.**注意事項(xiàng)**:-避免吸入、攝入或皮膚接觸。-配制過(guò)程中應(yīng)嚴(yán)格按配方配制。-pH調(diào)節(jié)不宜過(guò)高或過(guò)低。-培養(yǎng)基滅菌后應(yīng)進(jìn)行無(wú)菌檢查。6.**特別說(shuō)明**:-不適宜制備高濃度母液,會(huì)有沉淀產(chǎn)生。DCR培養(yǎng)基的配方是完全定義的,不含動(dòng)物衍生成分,從而減少了潛在的影響和免疫反應(yīng)風(fēng)險(xiǎn)。這種培養(yǎng)基在植物組織培養(yǎng)中有著廣泛的應(yīng)用,尤其是在研究植物細(xì)胞重編程、干細(xì)胞和組織工程等領(lǐng)域。某些細(xì)菌能產(chǎn)生尿素酶,將尿素分解產(chǎn)生氨,使培養(yǎng)基變?yōu)閴A性,酚紅指示劑在pH升高時(shí)變色(通常為粉紅色)。
蠟狀芽孢桿菌瓊脂基礎(chǔ)(TSSB)是一種用于分離和培養(yǎng)蠟樣芽孢桿菌(Bacilluscereus)的培養(yǎng)基。以下是它的一些主要特點(diǎn):1.**成分**:蠟狀芽孢桿菌瓊脂基礎(chǔ)的配方包含胰酪蛋白胨、牛肉浸粉、D-甘露醇、氯化鈉、苯酚紅和瓊脂等成分。其中,胰酪蛋白胨和牛肉浸粉提供碳源和氮源,D-甘露醇作為可發(fā)酵的糖,氯化鈉維持滲透壓,苯酚紅作為pH指示劑,瓊脂作為凝固劑。2.**pH值**:該培養(yǎng)基的pH值通常調(diào)節(jié)在7.2±0.2(25℃)。3.**滅菌處理**:制備好的培養(yǎng)基需要進(jìn)行121℃高壓滅菌15分鐘。4.**添加劑**:每瓶需配套添加多粘菌素B和50%卵黃乳液使用,每100ml蠟樣芽孢桿菌選擇性瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)中添加1支多粘菌素B和2支50%卵黃乳液。5.**用法**:稱(chēng)取本品43.0g加熱溶解于1000ml蒸餾水中,分裝每瓶100ml,121℃高壓滅菌15分鐘,冷至50℃左右時(shí),每瓶加入10ml50%的無(wú)菌卵黃乳液和多粘菌素B10000IU混勻,傾入無(wú)菌平皿,備用。6.**菌落特征**:蠟樣芽孢桿菌在TSSB上生長(zhǎng)時(shí),菌落通常為微粉紅色,周?chē)械奂t色沉淀環(huán),這有助于識(shí)別蠟樣芽孢桿菌。7.**質(zhì)量控制**:進(jìn)行微生物靈敏度試驗(yàn)時(shí),按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基,接種質(zhì)控菌株,放置36±1℃需氧培養(yǎng)24-48小時(shí)。TGC液體培養(yǎng)基需要進(jìn)行高壓滅菌,以確保無(wú)菌。常用的滅菌方法包括加熱滅菌、過(guò)濾除菌、及化學(xué)試劑滅菌等。TSA+卵磷脂+吐溫80平板
BHI培養(yǎng)基可用于從臨床標(biāo)本中進(jìn)行需氧細(xì)菌的初步分離,也可用于培養(yǎng)單增李斯特菌、葡萄球菌等。NGA培養(yǎng)皿
疊氮鈉血瓊脂基礎(chǔ)(AzideBloodAgarbase)是一種選擇性培養(yǎng)基,主要用于從糞便、污水和其他樣本中分離和檢測(cè)鏈球菌和葡萄球菌。以下是它的一些特點(diǎn)和配制方法:**特點(diǎn)**:1.**成分**:含有胰蛋白胨、肉浸粉、氯化鈉、疊氮鈉和瓊脂等成分,其中疊氮鈉作為選擇性抑制劑,對(duì)大多數(shù)革蘭氏陰性菌具有抑制作用,但允許某些革蘭氏陽(yáng)性菌如鏈球菌和葡萄球菌的生長(zhǎng)。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),為細(xì)菌提供適宜的生長(zhǎng)環(huán)境。3.**應(yīng)用**:除了用于分離培養(yǎng)鏈球菌和葡萄球菌,疊氮鈉血瓊脂基礎(chǔ)還可用于測(cè)定溶血反應(yīng)。4.**溶血反應(yīng)**:在該培養(yǎng)基上,可以觀察到α溶血(培養(yǎng)基變綠)、β溶血(菌落周?chē)囵B(yǎng)基變透明)和γ溶血(培養(yǎng)基無(wú)變化)。**配制方法**:1.稱(chēng)取33.2g培養(yǎng)基粉末,加入1000mL蒸餾水或去離子水中。2.加熱煮沸至完全溶解。3.121℃高壓滅菌15分鐘。4.冷卻至50℃左右,加入50mL無(wú)菌羊血,混勻后倒入無(wú)菌培養(yǎng)皿中。**注意事項(xiàng)**:-避免攝入、吸入、皮膚接觸疊氮鈉,配制時(shí)應(yīng)在通風(fēng)櫥中進(jìn)行,并佩戴適當(dāng)?shù)膫€(gè)人防護(hù)裝備。-培養(yǎng)基中含有的疊氮鈉具有劇毒,應(yīng)妥善處理和保存。NGA培養(yǎng)皿
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