導(dǎo)師給我們上的堂課往往就是交代我們要詳細記好實驗記錄，只要是和實驗相關(guān)的，無論是照片，還是文字，必須要及時事無巨細地詳細記錄。并且要備份好每一份實驗記錄。我個人一般喜歡每天及時地記在「科研實驗記錄本」上面，然后拍照掃描成電子版儲存在電腦和云端。時間規(guī)劃首先，個人是不贊同每天24小時泡在實驗室的，高效率是關(guān)鍵。建議提前一天規(guī)劃好第二天需要做的事情，按照代辦事項的格式逐條列出，哪一個時間段需要做什么事情？這樣的好處有兩點，一個是自己提前把時間預(yù)約好，可以留出足夠的時間休息和娛樂；另一個是在執(zhí)行計劃的時候往往會有一種時間緊迫感，辦事起來往往更高效且不會遺漏。總之，預(yù)實驗就是迷你版正式實驗，希望小伙伴們在進行預(yù)實驗的時候一定要盡可能地準備周全，這樣才能快的推進正式實驗。IgA腎病小鼠模型IgA 腎病是常見的原發(fā)性腎小球疾病,約占原發(fā)性腎小球疾病的 1/3。上海裸鼠動物模型實驗

    動物的選擇目前常用的模式生物有果蠅、酵母、小鼠、斑馬魚等。目前主要是小鼠黑色素瘤模型。造模方法黑色素瘤小鼠模型可分為誘發(fā)性模型、移植性模型、轉(zhuǎn)基因模型。一、誘導(dǎo)性模型應(yīng)用：誘導(dǎo)的小鼠模型模擬人類受外界因素影響獲得的黑色素瘤，常用于研究預(yù)防黑色素瘤形成。1紫外線誘導(dǎo)的小鼠模型通過紫外線照射獲得的黑色素瘤模型被認為是臨床上可靠的模型。方法：有研究者將HGF/SFcDNA表達的小鼠置于日光燈下用不同劑量(kJ/m2UVB、kJ/m2UVA、)進行紫外誘導(dǎo)15min。模型驗證：誘導(dǎo)后的小鼠出現(xiàn)皮膚發(fā)紅，偶有淺表皮脫屑，在組織病理學(xué)中觀察到小鼠產(chǎn)生的大多數(shù)皮膚黑色素瘤中具有真皮成分，病變顯示具有垂直生長期或浸潤性惡性黑色素瘤以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，這些病變與人類患者黑色素瘤頁面狀擴散的表皮內(nèi)病變特征相似。缺點：但野生型或正常型小鼠一般不易發(fā)生UV誘導(dǎo)的黑色素瘤，因此UV誘導(dǎo)的黑色素瘤小鼠模型往往需要聯(lián)合免疫缺陷小鼠，其操作技術(shù)較難、成本較高。2化學(xué)誘導(dǎo)化學(xué)致物誘導(dǎo)黑色素瘤小鼠模型大多采用DMBA和TBA誘導(dǎo)。DMBA是一種免疫抑制多環(huán)芳烴，其致機理是其活性代謝物被CYP450代謝成致物1，2－環(huán)氧化物-3，4-二醇DMBA，進而損傷DNA。TPA是通過蛋白激酶C充當(dāng)啟動子。上海動物模型造模博萊霉素是具有多種抗腫瘤作用的多組分，其毒副作用之一是引起肺纖維化。

    指明方向。盡管現(xiàn)在基因組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組、蛋白質(zhì)組等組學(xué)已經(jīng)取得了非凡的突破，但人類對于組學(xué)的整體性和復(fù)雜性認識還是很初級，也就比開始高明那么一點點，對橫亙在組學(xué)和個體之間的裂隙毫無辦法——這也是目前生物研究被黑的重要原因之一：由于目前還不存在什么生物根本性原理，很多研究還是得靠盲人摸象式的實驗、觀察和歸納。當(dāng)年山中伸彌找到誘導(dǎo)分化細胞核重編程（也就是IPSc技術(shù)）的四個基因，可不是用理論算出來的，是大海撈針般地從成百上千個轉(zhuǎn)錄因子基因組合中篩選出來的。盡管以前的研究能有所幫助，但本質(zhì)還是差別不大，這也是為什么分子生物學(xué)科研常常被類比成民工搬磚。明白了這個背景，你大概就能理解小鼠的意義。既然我們對復(fù)雜系統(tǒng)的架構(gòu)原理毫無辦法，那我們不妨就建立一個標準模型，自上而下地研究問題。誠然，動物模型和人類差別巨大，小鼠、大鼠、兔、猴身上做的好好的實驗，放在人身上就不靈了（有時候，即使是針對某一個人群成功的實驗，換一個人群就不靈了，人類內(nèi)部的多樣性都不容小覷）。但是，同在哺乳動物大家庭，大家的系統(tǒng)架構(gòu)應(yīng)該是差不多的，差別只在細節(jié)，問題已經(jīng)從大海撈針變成了池塘撈針。為什么藥物會失效呢？如果是靶點有差異。

    擴增產(chǎn)物為。其中a2,3,6,9,10,b1為陽性。擴增3’端長臂使用引物：neof:5’-cgccttcttgacgagttcttctga-3’；gm3’lrr:5’-ggtgcttgagtagtgttgaatctcagtggacca-3’結(jié)果見圖3中b，擴增產(chǎn)物為。其中：a2,3,6,9,10,b6,9,es1g,es2g為陽性雜合子，+/+為野生型對照。5將步驟4得到的雜合子小鼠動物與轉(zhuǎn)基因鼠flper鼠交配繁育，得到gm20541基因條件性敲除雜合子小鼠；6將步驟5得到的gm20541基因條件性敲除雜合子小鼠相互交配繁育，得到gm20541基因條件性敲除純合子小鼠；7將步驟6得到的gm20541基因條件性敲除純合子動物與轉(zhuǎn)six3-cre基因動物交配，得到視網(wǎng)膜前體細胞gm20541基因敲除小鼠。轉(zhuǎn)基因鼠flper鼠購自美國捷克森實驗室(品系名稱：(rosa)26sortm1(flp1)dym/rainj)。six3-cre轉(zhuǎn)基因小鼠(mgi：3574771)由美國德克薩斯大學(xué)安德森中心贈送。six3是一個前腦腹側(cè)和視網(wǎng)膜前體細胞的標志性轉(zhuǎn)錄因子，其特異性驅(qū)動cre基因在視網(wǎng)膜前體細胞表達，cre蛋白可以進入細胞核，識別基因組上loxp位點，實現(xiàn)基因敲除?；蚯贸∈箬b定步驟：對上述視網(wǎng)膜前體細胞敲除gm20541基因的小鼠的基因型鑒定，操作如下：(1)剪小鼠尾梢少許組織樣本，置于干凈的；(2)在離心管中加入100μl裂解液。缺血性腦血管病(ICVD)是威脅人類健康與生存的主要疾病之一。

皮膚淺II°及深I(lǐng)I°燙傷大鼠模型一、服務(wù)信息1、動物模型名稱：皮膚淺II°及深I(lǐng)I°燙傷大鼠模型2、實驗動物種屬：SD大鼠3、實驗動物性別：雌雄不限4、實驗動物年齡：成年5、實驗動物體重：160-200g6、實驗動物環(huán)境：SPF級二、服務(wù)項目服務(wù)編號服務(wù)內(nèi)容服務(wù)周期價錢DH2025皮膚淺II°及深I(lǐng)I°燙傷大鼠模型1周詢價1、實驗方法：熱力致皮膚損傷法。麻醉大鼠，根據(jù)體重腹部備皮，然后固定于實驗臺上。將大鼠移近加熱純凈水的燒杯，將紗布條浸入熱水中，待水溫恒定于99℃時，取出紗布，立即平鋪于待燙部位，于紗布接觸大鼠皮膚后開始計時。致傷3s為淺II°燙傷，致傷10s為深I(lǐng)I°燙傷。2、檢測標準：a.皮膚大體觀察：致傷3s大鼠局部皮膚發(fā)紅、輕微水腫。愈合后毛發(fā)生長良好，有少量紅褐**素沉著，皮膚輕微攣縮，表皮光滑；致傷10s大鼠局部皮膚發(fā)白、水腫。愈合后毛發(fā)生長良好，皮膚瘢痕形成，表面粗糙不平。b.皮膚組織病理學(xué)觀察：致傷3s大鼠表皮層次尚清楚，細胞明顯腫脹、變性，層次結(jié)構(gòu)尚清楚，細胞核結(jié)構(gòu)不清；致傷10s大鼠表皮細胞部分脫落，結(jié)構(gòu)不清，明顯變性、壞死，部分細胞已溶解。三、交付標準:1.提供動物模型構(gòu)建過程中的原始實驗記錄及數(shù)據(jù)圖片。急性肺損傷(acute lung injury，ALI)。上海大鼠動物模型培養(yǎng)

可以嚴格控制實驗條件，增強實驗材料的可比性。上海裸鼠動物模型實驗

準備碎冰和。把膜置于甲醇溶液中活化1分鐘，然后轉(zhuǎn)移至轉(zhuǎn)膜液中平衡3分鐘后備用。2、轉(zhuǎn)膜組裝轉(zhuǎn)膜三明治夾，這一步很關(guān)鍵，重要的是膠和膜之間不能有氣泡且膜與膠要保證貼合緊密(否則會翻車)，可以加多點轉(zhuǎn)膜液泡著。組裝好后加滿轉(zhuǎn)膜液，設(shè)置電源參數(shù)，我習(xí)慣恒流轉(zhuǎn)膜，200-280毫安，1-2小時，根據(jù)分子量定，如50KD的分子用60分鐘就夠了。如果一個電源帶兩個轉(zhuǎn)膜大槽即四塊膠，我就會用恒壓70-110V。這個過程重要的是做好降溫。這里簡單說一下蛋白分子量與玻璃板厚度，分離膠的濃度，轉(zhuǎn)膜電源參數(shù)的選擇問題。如果是能用1毫米的玻璃板就不用，因為轉(zhuǎn)膜是在電場的作用下蛋白分子從膠上遷移到膜上，1毫米膠的蛋白遷移距離要比。選擇更薄的膠蛋白轉(zhuǎn)膜時間可以減少，從而減少發(fā)熱，以免膠變形，條帶也會更好看。然后是分離膠的濃度，如果是150—200KD的分子選10%以下的的分離膠，200—300KD的選8%的,300KD以上的選6%的，小于30KD的200mA30分鐘，30-100KD的按分子量的數(shù)值算，如70KD，250mA70分鐘;100-150KD的250mA100分鐘;150—300KD的分子轉(zhuǎn)膜條件用280毫安(以上均是對于，)，120分鐘足矣，前提是膠的濃度相適應(yīng)。五、封閉孵一抗1、封閉轉(zhuǎn)膜結(jié)束后。上海裸鼠動物模型實驗