原位雜交第三天

1） 用1ml含10%熱滅清的MABT溶液置換溶液，放置搖床上25分鐘，然后用1mlMABT置換，25分鐘，再用1mlMABT溶液置換，一小時以上，后用1mlMABT溶液置換，25分鐘。

2） 用1ml 1mM左旋米睉的Staining buffer洗三次，每次放置五分鐘。

3）將胚胎轉(zhuǎn)入十六孔板中，吸去staining buffer，加上300ul BM Purple AP Substrate（底物，用之前加5mM左旋米唑），十六孔板外面包上錫箔紙以避光，避免搖動，植物染色體原位雜交測試服務(wù)，室溫下顯色。

4）每隔一小時觀察胚胎是否開始顯色

5）將顯色完全的胚胎中的底物吸出，用PBST洗兩三次后加上4%多聚甲醛固定，拍照。

6）4C冰箱保存。

20世紀(jì)80年代的DNA原位雜交開啟了分子病理檢測的大門，隨后相繼出現(xiàn)了在組織切片上的原位雜交，目的是檢測肝1炎和肝1癌組織中的乙1肝1病毒。之后，越來越多的腫1瘤相關(guān)基因被發(fā)現(xiàn)，一批用于檢測靶向治1療藥1物靶點的分子病理技術(shù)迅速問世，如FISH檢測乳1腺癌HER2基因擴增、ARMS法檢測肺1癌1基因突變等。



基因芯片又稱DNA芯片或DNA微陣列。其原理是在固體載體(硅片、玻片、硝1酸纖維素膜)上按照特定的排列方式集成大量已知DNA/cDNA片段，形成DNA/cDNA微矩陣。 　　基因芯片技術(shù)是一門新興的技術(shù)，由于該技術(shù)能在一次實驗中自動、快速、敏感地同時檢測數(shù)千條序列，而且獲得的序列信息高度特異、穩(wěn)定。根據(jù)探針類型分為DNA芯片和cDNA芯片，前者用于檢測基因突變，實現(xiàn)腫1瘤早期診斷、判斷預(yù)后及治1療;后者用于檢測基因表達(dá)，對腫1瘤進(jìn)行發(fā)現(xiàn)性分類和預(yù)測性分類。




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