全自動(dòng)核酸提取儀如何操作呢？

核酸提取儀配套試劑及其操作步驟，買(mǎi)了儀器后一定要考慮后續(xù)使用配套試劑的問(wèn)題：

1）配套試劑是否齊全。不同樣本類(lèi)型的提取試劑盒產(chǎn)品鏈?zhǔn)欠裢暾?/p>

2）配套試劑是不是預(yù)封裝。非預(yù)封裝的試劑需要實(shí)驗(yàn)員用移液器加入裂解液、洗滌液和洗脫液等試劑，并沒(méi)有減少人工操作時(shí)間；

3）提取前除了加樣本外。是否需要添加蛋白酶K，由于有些公司并沒(méi)有掌握裂解液中預(yù)封裝蛋白酶K且常溫儲(chǔ)存的技術(shù)，蛋白酶K需要-20℃單獨(dú)保存，需即用即加。每個(gè)樣本多加一步蛋白酶K，96個(gè)樣本多了10~15min左右的操作時(shí)間。

4）配套試劑的保存溫度。有些廠家的提取試劑需要在2—8℃運(yùn)輸保存，冷鏈運(yùn)輸增加運(yùn)輸成本，保存需要在冰箱中，而預(yù)封裝提取試劑體積較大，在用量大特別像新冠這樣大批量的使用，完全沒(méi)有足夠冰箱可以進(jìn)行一段時(shí)間試劑的儲(chǔ)存空間。

5）提取后的擴(kuò)增效率。提取核酸時(shí)觀察磁珠殘留率并且檢測(cè)提取核酸質(zhì)量！

全自動(dòng)核酸提取儀——原理介紹

磁珠法核酸提取儀的基本原理概括總結(jié)

1. 抽吸法，也叫移液法，是通過(guò)固定磁珠、轉(zhuǎn)移液體來(lái)實(shí)現(xiàn)核酸的提取，一般通過(guò)操作系統(tǒng)控制機(jī)械臂來(lái)實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)移。提取過(guò)程如下:

1) 裂解：在樣品中加入裂解液，通過(guò)機(jī)械運(yùn)動(dòng)及加熱實(shí)現(xiàn)反應(yīng)液的混勻及充分反應(yīng)，細(xì)胞裂解，釋放核酸。

2) 吸附：在樣品裂解液中加入磁珠，充分混勻，利用磁珠在高鹽低PH值下對(duì)核酸具有很強(qiáng)親和力的特點(diǎn)，吸附核酸，在外加磁場(chǎng)作用下，磁珠與溶液分離，利用吸頭將液體移出棄至廢液槽，吸頭棄掉。

3) 洗滌：撤去外加磁場(chǎng)，換用新吸頭加入洗滌緩沖液，充分混勻，去除雜質(zhì)，在外加磁場(chǎng)作用下，將液體移出。

4) 洗脫：撤去外加磁場(chǎng)，換用新吸頭加入洗脫緩沖液，充分混勻，結(jié)合的核酸即與磁珠分離，從而得到純化的核酸。

2. 磁棒法

磁棒法是通過(guò)固定液體，轉(zhuǎn)移磁珠來(lái)實(shí)現(xiàn)核酸的分離，原理和過(guò)程與抽吸法的一樣，不同的是磁珠和液體分離的方式。磁棒法是通過(guò)磁棒對(duì)磁珠的吸附將磁珠從廢液中分離開(kāi)，放入下一步的液體中，實(shí)現(xiàn)核酸的提取。

全自動(dòng)核酸提取儀——類(lèi)型介紹

磁珠法自動(dòng)核酸提取儀又分為磁棒法和抽吸法

先說(shuō)抽吸法：顧名思義，抽吸法就是通過(guò)自動(dòng)移液裝置來(lái)進(jìn)行，通過(guò)自動(dòng)移液裝置來(lái)加入裂解液、磁珠吸附；抽走裂解液，加入漂洗液，磁珠吸附，抽走漂洗液，加入洗脫緩沖液。從步驟上好像沒(méi)什么問(wèn)題，但是抽吸法的問(wèn)題在于，全自動(dòng)核酸提取儀價(jià)格，為了在去除廢液的時(shí)候不抽走磁珠，移液器不能靠磁珠太近，以防磁珠連同廢液被抽掉，這樣每一次抽廢液的時(shí)候總有一小部分不能完全的抽走，特別是磁鐵在底部的裝置，因?yàn)榇胖楸淮盆F吸附在底部，所以移液器不能靠底部太近，這樣漂洗液就不能完全去除，全自動(dòng)核酸提取儀哪家好，殘留的漂洗液中的鹽和乙醇會(huì)影響后面的洗脫效率和PCR成功率；磁鐵在側(cè)面的裝置殘留的液體會(huì)少些，但是洗脫的效率也不好，依靠DNA自行溶解到洗脫緩沖液中，除非等上半小時(shí)以上，所以有些96自動(dòng)核酸提取工作站，提取一輪的時(shí)間需要150分鐘，32磁棒法的同樣的時(shí)間可以提5輪了。

再說(shuō)磁棒法核酸提取儀：通量通常有8、16、32、96通道，相對(duì)于抽吸法，磁棒法的優(yōu)點(diǎn)是每一步的液體不殘留，因?yàn)榇虐糁粠ё叽胖?，轉(zhuǎn)移到下一個(gè)步驟相應(yīng)的反應(yīng)孔中，另外選擇磁棒法的提取儀器盡量要功能更齊全的，比如可以加熱，每個(gè)加熱槽獨(dú)立溫控，全自動(dòng)核酸提取儀廠家，這樣可以設(shè)置加熱、裂解、洗脫的不同溫度，另外很重要的一點(diǎn)是，帶動(dòng)磁棒的電機(jī)要能帶動(dòng)磁棒進(jìn)行液體的快速混勻和攪拌，這樣才有利于自動(dòng)化和有助于裂解和漂洗。磁棒法的通量選擇盡量是32通道，96通道的看似通量更高，但是有個(gè)很現(xiàn)實(shí)的問(wèn)題，96個(gè)磁力棒在從一個(gè)板轉(zhuǎn)移至另外一個(gè)板的時(shí)候，全自動(dòng)核酸提取儀，磁力棒上面的液體中途滴下來(lái)怎么辦，它會(huì)滴到別的孔中造成污染，而32通道的磁力棒運(yùn)行軌跡不經(jīng)過(guò)其他樣本的上空，這樣不會(huì)交叉污染。

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