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結晶紫指示液
取結晶紫0.5g,加冰醋酸100mL使溶解,即得。
操作步驟:精密稱取供試品約0.5g,置錐形瓶中,加冰醋酸15mL溶解后,加結晶紫指示液1滴,用滴定液(0.1mol/L)滴定至溶液顯綠色,并將滴定結果用空白試驗校正。記錄消耗滴定液的體積數(shù)(mL),每1mL定液(0.1mol/L)相當于52.86mg的C22H28N2O·C6H8O7。
檸檬酸的發(fā)酵因、工藝、原料而異,檸檬酸銷售,但在發(fā)酵過程中還需要掌握一定的溫度、通風量及pH值等條件。一般認為,黑曲霉適合在28~30℃時產(chǎn)酸。溫度過高會導致菌體大量繁殖,糖被大量消耗以致產(chǎn)酸降低,同時還生成較多的草酸和葡萄糖酸;溫度過低則發(fā)酵時間延長。微生物生成檸檬酸要求低pH,適pH為2~4,這不僅有利于生成檸檬酸,減少草酸等雜酸的形成,同時可避免雜菌的污染。
檸檬酸發(fā)酵要求較強的通風條件,有利于在發(fā)酵液中維持一定的溶解氧量。通風和攪拌是增加培養(yǎng)基內溶解氧的主要方法。隨著菌體生成,發(fā)酵液中的溶解氧會逐漸降低,從而抑制了檸檬酸的合成。采用增加空氣流速及攪拌速度的方法,使培養(yǎng)液中溶解氧達到60%飽和度對產(chǎn)酸有利。檸檬酸生成和菌體形態(tài)有密切關系,若發(fā)酵后期形成正常的菌球體,有利于降低發(fā)酵液粘度而增加溶解氧,因而產(chǎn)酸就高;若出現(xiàn)異狀菌絲體,而且菌體大量繁殖,造成溶解氧降低,使產(chǎn)酸迅速下降。發(fā)酵液中金屬離子的含量對檸檬酸的合成有非常重要的作用,檸檬酸,過量的金屬離子引起產(chǎn)酸率的降低,由于鐵離子能刺激烏頭酸水合酶的活性,檸檬酸報價,從而影響檸檬酸的積累。
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1893年C.韋默爾發(fā)現(xiàn)青霉(屬)菌能積累檸檬酸。1913年B.扎霍斯基報道黑曲霉能生成檸檬酸。1916年湯姆和柯里以曲霉屬菌進行試驗,證實大多數(shù)曲霉菌如泡盛曲霉、米曲霉、溫氏曲霉、綠色木霉和黑曲霉都具有產(chǎn)檸檬酸的能力,而黑曲霉的產(chǎn)酸能力更強。
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