磷酸鹽緩沖液取磷酸二氫鈉，與磷酸氫二鈉。磷酸鹽緩沖液()甲液:取磷酸，加水至1000ml，搖勻。乙液：取磷酸氫二鈉，加水使溶解成1000ml。取上述甲液，搖勻，即得。磷酸鹽緩沖液()取磷酸二氫鉀100g，加水800ml，用鹽酸調(diào)節(jié)pH至。磷酸鹽緩沖液()取，即得。磷酸鹽緩沖液()取磷酸二氫鉀，即得。磷酸鹽緩沖液()取磷酸二氫鉀，用水稀釋至100ml，即得。磷酸鹽緩沖液()取磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉，加水使溶解成400ml，即得。磷酸鹽緩沖液(含胰酶)()取磷酸二氫鉀；另取胰酶10g，加水適量使溶解，將兩液混合后,加水稀釋至1000ml，即得。磷酸鹽緩沖液()取，加，用水稀釋至1000ml，搖勻，即得。磷酸鹽緩沖液()取磷酸二氫鉀，加，用水稀釋至100ml，即得。磷酸鹽緩沖液()取，加新沸過(guò)的冷水稀釋至200ml，搖勻，即得。磷酸鹽緩沖液()取磷酸氫二鈉，調(diào)節(jié)pH值至，即得。磷酸鹽緩沖液()取磷酸二氫鉀，加，用水稀釋至200ml，即得。磷酸鹽緩沖液()取磷酸二氫鉀，加水使溶解成1000ml，取50ml，加，再加水稀釋至200ml，即得。磷酸鹽緩沖液()甲液：取磷酸氫二鈉，加水溶解，并稀釋至500ml。乙液：取磷酸二氫鈉，加水溶解，并稀釋至100ml。取上述甲液，搖勻，即得。磷酸鹽緩沖液(～)取磷酸氫二鉀。PBS緩沖液中的磷酸鹽和鹽水可以維持實(shí)驗(yàn)體系的離子強(qiáng)度穩(wěn)定。湖北EBSS緩沖液價(jià)目表

PBS溶液又稱磷酸鹽緩沖溶液，一般選擇Na2HPO4和KH2PO4配制，因?yàn)殁c鹽溶解的較慢。根據(jù)不同pH的溶液，稱量不同質(zhì)量的磷酸鹽，也可以用pH計(jì)調(diào)溶液的pH。PBS一般用作支持電解質(zhì)。

配置方法播報(bào)編輯采用去離子水、KH2PO4和Na2HPO4·2H2O配制PBS溶液，按以下步驟進(jìn)行：(1) 配制1/15mol/L KH2PO4，即每升水中溶解9.078克KH2PO4；(2) 配制1/15mol/LNa2HPO4·2H2O，即每升水中溶解11.876克Na2HPO4·2H2O；(3) 將18.2%（體積分?jǐn)?shù)）KH2PO4溶液和81.8%Na2HPO4·2H2O混合； 云南HBSS緩沖液有哪些緩沖液（Buffer solution）通常是由弱酸及其共軛堿或弱堿及其共軛酸緩沖對(duì)所組成的溶液。

    1:50～l:800)后，按行進(jìn)行包被、洗滌。按列分別加入用稀釋液1:100稀釋的強(qiáng)陽(yáng)性、弱陽(yáng)性、陰性參考血清及稀釋液(作空白對(duì)照)，保溫，洗滌。加工作濃度酶標(biāo)抗體，洗滌，加底物顯色，加酸終止反應(yīng)后讀取A值。選擇強(qiáng)陽(yáng)性參考血清A值；為0．8左右，陰性參考血清A值<0．1的包被抗原稀釋度為工作濃度。?方陣(棋盤)法選擇包被抗體和酶標(biāo)抗體的工作濃度將抗體用包被液稀釋為10mg／L、lmg／L、／L三個(gè)濃度按行包被，每一個(gè)濃度包被三行(每行3孔)，分別在每個(gè)濃度包被的***、二、三行中分別加入強(qiáng)陽(yáng)性抗原，弱陽(yáng)性抗原和陰性對(duì)照，將酶標(biāo)抗抗體用稀釋液稀釋為1:l000、l:5000、l:10000三個(gè)濃度，分別加入每個(gè)濃度包被的***、二、三列中。加底物顯色，加酸終止反應(yīng)，分別讀取A值。以強(qiáng)陽(yáng)性抗原液A值在，陰性參考A值<**適條件。據(jù)此選擇包被抗體和酶標(biāo)抗體的**佳工作濃度。?二、ELISA**適工作濃度的選擇及標(biāo)準(zhǔn)化操作1**適工作濃度的選擇?1．1間接法測(cè)抗體?????酶標(biāo)抗體工作濃度的選擇：①用IgG進(jìn)行包被，洗滌。②將酶標(biāo)IgG用稀釋液作一系列稀釋后分別加入已包被的孔中，保溫、洗滌。③加酸終止反應(yīng)后，讀取吸光度(A)。讀取A值在1．0時(shí)的酶標(biāo)抗體稀釋度，作為酶標(biāo)抗體的工作濃度。

做ELISA確定抗原**佳包被濃度，做方陣滴定具體怎么做呢？選擇好一份已知為陽(yáng)性和陰性背景的標(biāo)本，將你的抗原用1*CBPH=*PBPH=（8個(gè)條件）后加入96孔板每孔100ul。（一般包被濃度100ng抗原或抗體/孔，**優(yōu)包被條件需進(jìn)行試驗(yàn)選擇）4度過(guò)夜取出后甩干，加入20%NBS封閉每孔200ul。37度2h熱封，甩去后拍干即可。將你HRP或AP標(biāo)記的抗原或二抗用酶標(biāo)稀釋液進(jìn)行稀釋（倍比稀釋4個(gè)梯度）即可。棋盤滴定就是板酶交叉,同時(shí)帶上陽(yáng)性、陰性通過(guò)試驗(yàn)確定**佳P/N的包被搭配E的試驗(yàn)2．抗原和抗體**佳工作濃度的確定?抗原抗體反應(yīng)要求在**適比例條件下進(jìn)行，ELISA反應(yīng)試劑多，其工作濃度不同對(duì)結(jié)果影響較大，因此必須對(duì)包被抗原(抗體)和酶標(biāo)抗體(抗原)進(jìn)行**佳工作濃度的滴定和選擇，以達(dá)到**佳的測(cè)定條件。?1）方陣(棋盤)滴定法選擇包被抗原的工作濃度用包被液將抗原作一系列稀釋。緩沖溶液是無(wú)機(jī)化學(xué)及分析化學(xué)中的重要概念。

HBSS 與 EBSSHanks 的平衡鹽溶液（HBSS）和 Earle 的平衡鹽溶液（EBSS）都是等滲溶液，用于維持生物應(yīng)用中的滲透壓和 pH 值。雖然 HBSS 和 EBSS 包括葡萄糖和碳酸氫鈉，用于短期維持生長(zhǎng)培養(yǎng)基以外的細(xì)胞，但 EBSS 在 5% CO2 下使用，而 HBSS 包含較少的碳酸氫鈉，可以在沒(méi)有 CO2 的情況下使用。從各種依應(yīng)用而定的配方中進(jìn)行選擇。

Dulbecco 的磷酸鹽緩沖液（DPBS）DPBS 與 PBS 的不同之處在于它還包括氯化鉀，并且提供多種配方。它也用于生物應(yīng)用，水基緩沖液，包括氯化鈉和磷酸鹽緩沖液。 長(zhǎng)時(shí)間或過(guò)量使用PBS緩沖液可能會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生耐受性,導(dǎo)致惡心、嘔吐、腹瀉等癥狀。湖北EBSS緩沖液價(jià)目表

酸和鹽濃度相等時(shí)，緩沖液的緩沖效率為高，比例相差越大，緩沖效率越低。湖北EBSS緩沖液價(jià)目表

    所有操作均應(yīng)在通風(fēng)櫥中進(jìn)行，與苯酚接觸過(guò)的皮膚部位應(yīng)用大量水清洗，并用肥皂和水洗滌，忌用乙醇。3.苯酚平衡：因?yàn)樵谒嵝詐H條件下DNA分配于有機(jī)相，因此使用苯酚前必須對(duì)苯酚進(jìn)行平衡使其pH值達(dá)到，苯酚平衡操作方法如下：①液化苯酚應(yīng)貯存于-20℃，此時(shí)的苯酚呈結(jié)晶狀態(tài)。從冰柜中取出的苯酚首先在室溫下放置使其達(dá)到室溫，然后在68℃水浴中使苯酚充分融解。②加入羥基喹啉（8-Quinolinol）至終濃度。該化合物是一種還原劑、RNA酶的不完全抑制劑及金屬離子的弱螯合劑，同時(shí)因其呈黃色，有助于方便識(shí)別有機(jī)相。③加入等體積的1MTris-HCl（)，使用磁力攪拌器攪拌15分鐘，靜置使其充分分層后，除去上層水相。④重復(fù)操作步驟③。⑤加入等體積的MTris-HCl（)，使用磁力攪拌器攪拌15分鐘，靜置使其充分分層后，除去上層水相。⑥重復(fù)操作步驟⑤，稍微殘留部分上層水相。⑦使用pH試紙確認(rèn)有機(jī)相的pH值大于。⑧將苯酚置于棕色玻璃瓶中4℃避光保存。苯酚/氯仿/異戊醇(25:24:1)配制方法：1.說(shuō)明：從核酸樣品中除去蛋白質(zhì)時(shí)常常使用苯酚/氯仿/異戊醇（25:24:1)。氯仿可使蛋白質(zhì)變性并有助于液相與有機(jī)相的分離，而異戊醇則有助于消除抽提過(guò)程中出現(xiàn)的氣泡。湖北EBSS緩沖液價(jià)目表