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PCR實驗室建設(shè)的幾個注意事項:標準的四區(qū)分隔和氣流控制:標準的四區(qū)分隔:試劑準備、標本制備、PCR擴增檢測和擴增產(chǎn)物檢測四個獨立的實驗區(qū)。每個獨立實驗區(qū)設(shè)置有緩沖區(qū),空氣壓力嚴格按照試劑儲存和準備區(qū)→標本制備區(qū)→擴增區(qū)→擴增產(chǎn)物分析區(qū)逐漸遞減方式進行,防止擴增產(chǎn)物順空氣氣流進入擴增前的區(qū)域。
消毒:在4個實驗區(qū)和4個緩沖區(qū)頂部以及傳送窗內(nèi)部安裝有紫外燈,供消毒用。在試劑準備區(qū)和標本制備區(qū)還設(shè)置移動紫外線燈,對實驗桌進行局部消毒。
機械連鎖不銹鋼傳遞窗:試劑和標本通過機械連鎖不銹鋼(不建議使用電子連鎖方式)傳遞窗傳遞,方便實驗室工作人員傳遞物品又可減少實驗室人員進出實驗,確保試劑和標本在傳遞過程中不受污染室。
地面:室內(nèi)地面建議使用PVC材質(zhì)地面,具有耐腐蝕,耐磨損,平整度好,并且容易清掃。地角線用陰角鋁裝飾,嚴密性好且美觀。
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PCR實驗室管理細則規(guī)范:
試劑儲存和準備區(qū)只能用于試劑的貯存和配置。
樣品和標本處理區(qū)只能進行臨床標本的保存,核酸提取、保存及其加入至擴增反應(yīng)管,測定RNA時cDNA的合成。
擴增產(chǎn)物分析區(qū)只能進行DNA或cDNA擴增,實時熒光PCR擴增產(chǎn)物的分析。
PCR實驗危險性較大,稍微不注意就可能造成事故的發(fā)生,所以在PCR實驗室工作的人員要嚴格遵守上述規(guī)范。
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PCR實驗室的設(shè)計規(guī)范
1、區(qū)域布局合理
PCR擴增試驗室原則上分為4個獨立的工作區(qū),即試劑準備區(qū)、樣品處理區(qū)、核酸擴增區(qū)、產(chǎn)物分析區(qū)。為避免交叉污染,必須嚴格按照單一方向進入每個工作區(qū),每個實驗區(qū)之間的試劑和樣品轉(zhuǎn)移應(yīng)通過轉(zhuǎn)移窗口進行。
2、標準的三區(qū)分隔
PCR過程可分為試劑制備、標本制備和PCR擴增檢測三個獨立的實驗區(qū),整個實驗區(qū)設(shè)置有一個整體緩沖走廊,每個獨立的實驗區(qū)都設(shè)有一個緩沖區(qū)。
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