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PCR實驗室為什么要進行三區(qū)隔離?
試劑配制區(qū)(Ⅰ區(qū)):潔凈的區(qū)域,保持微正壓使得外界空氣無法進入隔離污染源。并且陰性模板應該在此區(qū)加入PCR管并蓋蓋,嚴禁在此區(qū)域打開、存放裝有DNA模板的離心管。
DNA模板添加區(qū)(Ⅱ區(qū)):壓力比Ⅰ區(qū)低,保證內(nèi)部空氣不外泄,以免陽性模板的氣溶膠對外界環(huán)境造成污染。
擴增及PCR產(chǎn)物分析區(qū)(Ⅲ區(qū)):保持負壓,使得內(nèi)部空氣不外泄,以免擴增產(chǎn)物的氣溶膠對外界環(huán)境造成污染。操作時壓力遵循Ⅰ區(qū)→Ⅱ區(qū)→Ⅲ區(qū)單一方向進行,可移動PCR實驗室,不可逆向進行。
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核酸檢測PCR實驗室建設要點:通常PCR實驗室沒有嚴格的凈化要求,PCR實驗室裝修,需根據(jù)實驗內(nèi)容確定實驗室潔凈度。當PCR實驗樣品需要保護時,實驗室應設潔凈空調(diào)系統(tǒng)。對于2019-nCoV核酸檢測實驗室,建議設置10萬級凈化。
氣流組織宜采用上送下排,送風口和排風口布置應使室內(nèi)氣流停滯的空間降低到較小程度。在生物安全柜操作面或其他有氣溶膠操作地點的上方附件不得設送風口過濾器排風口應設在室內(nèi)被污染風險高的區(qū)域,單向布置,不得有障礙;不能以回(排)風夾墻代替排風直管,排風過濾裝置與排風總管的連接必須全部是實體風管。
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PCR實驗室設計建設標準規(guī)范
各區(qū)域的功能與設備
試劑制備區(qū)主要為擴增試劑的準備,分裝盒保存。主要設備有天平、冰箱、離心機、加樣器、紫外燈。
樣品制備區(qū)主要是樣品的混樣和測試樣品的制備。其主要設備有冰箱、生物安全柜、離心機、加樣器、振蕩器、恒溫水槽、上下水設備、廢棄物容器、紫外燈。操作臺是否使用生物安全柜、凈化工作臺,太原PCR實驗室,或工作臺,要根據(jù)樣品的性質(zhì)和制備要求來決定,如疾控中心、臨床醫(yī)學實驗室一般選擇生物安全柜,植物、檢疫等選擇柜。
擴散區(qū)為pcr擴增反應系統(tǒng)的制備和模板的添加、核酸擴增。在生物安全柜(超凈臺)內(nèi)進行加樣,超凈臺氣流方向宜選用垂直式。冰箱,生物安全柜,離心加樣裝置,PCR實驗室設計,廢物容器,紫外燈等。
擴增產(chǎn)物分析區(qū)為擴增產(chǎn)物的分析區(qū)域。如果只使用全自動擴增檢測儀,可將擴增區(qū)與擴增產(chǎn)物分析區(qū)合并為一個區(qū)。本區(qū)域所使用的儀器設備有、、加樣器和水浴箱等。
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