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PCR實驗室為什么要進行三區(qū)隔離?常見的三區(qū)是指:
1、試劑配制區(qū):PCR反應體系的配制區(qū)域。
2、標本處理區(qū):包括擴增模板的制備,即提取DNA的地方。
3、PCR擴增和產(chǎn)物分析區(qū):進行PCR擴增的區(qū)域,PCR實驗室,也是擴增產(chǎn)物進行凝膠電泳分析的區(qū)域。
如果將PCR擴增區(qū)域和產(chǎn)物分析區(qū)再次分開,就是四區(qū)隔離。四區(qū)隔離,主要目的是防止氣溶膠在各個PCR區(qū)域之間的流動,好的方法是每個區(qū)域隔一幢樓,但操作起來不現(xiàn)實,于是便有了針對不同區(qū)域設(shè)置正負壓的方法。
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PCR實驗室為什么要進行三區(qū)隔離?既然PCR三區(qū)隔離的目的是為了阻斷氣溶膠的交流,請注意以下細節(jié),思考一下氣溶膠來自哪里:
1. 每個區(qū)域都應配備專門的移液器,不可交叉混用。我們的一位用戶拿電泳室的移液器加模板,陰性對照擴出了很亮的條帶。
2. 每個區(qū)域都應配備專門的移液器吸頭,不可交叉混用。
3. 如果條件允許,在PCRⅢ區(qū)工作結(jié)束后再次進入PCR I區(qū)需要更換實驗服、一次性鞋套、帽子、手套。
4. 在PCR I區(qū)、PCRⅡ區(qū)配備帶濾芯吸頭。
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核酸檢測PCR實驗室建設(shè)要點:通常PCR實驗室沒有嚴格的凈化要求,需根據(jù)實驗內(nèi)容確定實驗室潔凈度。當PCR實驗樣品需要保護時,實驗室應設(shè)潔凈空調(diào)系統(tǒng)。對于2019-nCoV核酸檢測實驗室,建議設(shè)置10萬級凈化。
氣流組織宜采用上送下排,送風口和排風口布置應使室內(nèi)氣流停滯的空間降低到較小程度。在生物安全柜操作面或其他有氣溶膠操作地點的上方附件不得設(shè)送風口過濾器排風口應設(shè)在室內(nèi)被污染風險高的區(qū)域,單向布置,不得有障礙;不能以回(排)風夾墻代替排風直管,排風過濾裝置與排風總管的連接必須全部是實體風管。
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