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PCR 實(shí)驗(yàn)室基本要求:
1、 PCR 實(shí)驗(yàn)室依據(jù)所使用的方法可分為試劑準(zhǔn)備、標(biāo)本制備、擴(kuò)增、產(chǎn)物分析等三或四個(gè)區(qū)域。只是使用實(shí)時(shí)熒光PCR儀、HIV病毒載量測定儀的PCR實(shí)驗(yàn)室,有上述前面三個(gè)區(qū)域即可。各區(qū)域應(yīng)完全獨(dú)立分隔,不應(yīng)有任何的空氣直通。
2、標(biāo)準(zhǔn)的PCR實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)物分析區(qū)或三個(gè)區(qū)域的后一個(gè)區(qū)域(即擴(kuò)增及產(chǎn)物分析區(qū)),空氣流向應(yīng)由室外向室內(nèi),可通過在室內(nèi)設(shè)置通風(fēng)櫥、排風(fēng)扇或其他排風(fēng)系統(tǒng)達(dá)到空氣流由室外向室內(nèi)流動(dòng)的要求。
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PCR實(shí)驗(yàn)室為什么要進(jìn)行三區(qū)隔離?
試劑配制區(qū)(Ⅰ區(qū)):潔凈的區(qū)域,保持微正壓使得外界空氣無法進(jìn)入隔離污染源。并且陰性模板應(yīng)該在此區(qū)加入PCR管并蓋蓋,嚴(yán)禁在此區(qū)域打開、存放裝有DNA模板的離心管。
DNA模板添加區(qū)(Ⅱ區(qū)):壓力比Ⅰ區(qū)低,保證內(nèi)部空氣不外泄,以免陽性模板的氣溶膠對(duì)外界環(huán)境造成污染。
擴(kuò)增及PCR產(chǎn)物分析區(qū)(Ⅲ區(qū)):保持負(fù)壓,山西太原PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì),使得內(nèi)部空氣不外泄,以免擴(kuò)增產(chǎn)物的氣溶膠對(duì)外界環(huán)境造成污染。操作時(shí)壓力遵循Ⅰ區(qū)→Ⅱ區(qū)→Ⅲ區(qū)單一方向進(jìn)行,不可逆向進(jìn)行。
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核酸檢測PCR實(shí)驗(yàn)室建設(shè)要點(diǎn):生物安全:按照新型冠狀病毒實(shí)驗(yàn)室生物安全指南(第二版)的規(guī)定,2019-nCoV病原體暫按照第二類病原微生物進(jìn)行管理,則樣本植被區(qū)宜為負(fù)壓或加強(qiáng)型P2實(shí)驗(yàn)室,核酸操作應(yīng)在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。關(guān)鍵技術(shù)措施包括:
A.負(fù)壓(避免室內(nèi)潛在污染外泄)
B.氣流組織(室內(nèi)定向流,從低污染風(fēng)險(xiǎn)區(qū)流向高污染風(fēng)險(xiǎn)區(qū))
C.排風(fēng)無害化處理(過濾、高空排放)
平面布局:不論是組合式還是分散式布置的PCR實(shí)驗(yàn)室,各功能房間均宜設(shè)置獨(dú)立緩沖間。
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