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ELISA試劑盒檢測過程中的注意事項
ELISA實驗通用規(guī)則
ELISA試劑盒——ELISA實驗通用規(guī)則
1、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發(fā)。
Elisa試劑盒的注意事項
Elisa試劑盒是否滅活:加熱可滅清中補體系統(tǒng),在較少數(shù)情況下(培養(yǎng)ES細胞,平滑肌細胞時)建議滅活,在培養(yǎng)其余細胞時不建議滅清。滅活非常容易產(chǎn)生沉淀,如必須滅活請按56℃,30 min,輕微搖晃原則操作,滅活溫度高、時間長、搖晃不均都容易產(chǎn)生沉淀。
Elisa試劑盒培養(yǎng)基:無培養(yǎng)基在結果重復性、細胞體外分化方面有優(yōu)勢,但是,仍然是培養(yǎng)液中基本的添加物,尤其是在原代培養(yǎng)或細胞生長狀態(tài)不良時,常常會先使用有的培養(yǎng)液進行培養(yǎng),待細胞生長旺盛后再換成培養(yǎng)液。
Elisa試劑盒——Elisa實驗常見問題及解決方案
重復性不佳,高CV值
1 樣品不均一 加樣前充分混勻樣品,取樣確保移液位置一致;
2 包被板表面遭到破壞 洗板加樣時盡量小心,避免破壞板的包被表面
3 孔與孔之間的交叉污染 孵育后取下蓋子小心操作,避免孔與孔的污染;封板膜不能重復使用
4 加樣量不一致 樣品稀釋前應充分混勻,盡可能使用同一移液器并裝緊吸嘴
5 邊緣效應(外周孔顯色較中心孔深) 孵育時盡量100 rpm旋轉混勻
6 微量加樣不準確 保證微量加樣的準確性和均一性
7 不正確的洗滌 洗液準確配制;充分洗滌,靜置15秒,確定每一步的洗滌