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甘肅酶聯(lián)ELISA試劑盒公司服務放心可靠「多圖」

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發(fā)布時間:2021-10-07 04:23  






ELISA試劑盒檢測過程中的注意事項

ELISA實驗通用規(guī)則

1、要保證移液槍的準確性,誤差不能超過2%??捎盟碗娮犹炱竭M行確定。但要有專業(yè)人員進行矯正。
2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標準品時。
3、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復到室溫,以使結果更穩(wěn)定。
4、實驗時,要使底物避光保存。
5、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準確。
6、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
7、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
8、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用儀器的晃動功能。


ELISA試劑盒——ELISA實驗通用規(guī)則

1、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發(fā)。

2、洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加徹底。倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
3、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
4、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
5、檢測前,要打開酶標,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
6、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應盡量避免接觸。
7、待檢樣品要澄清,否則會影響結果。
8、溫浴時間應遵守試劑盒規(guī)定。
9、應盡量做雙孔實驗,這樣才能保證數(shù)據(jù)的準確性。
10、對結果有疑問的樣品要用其它方法進行確證。



Elisa試劑盒的注意事項

Elisa試劑盒是否滅活:加熱可滅清中補體系統(tǒng),在較少數(shù)情況下(培養(yǎng)ES細胞,平滑肌細胞時)建議滅活,在培養(yǎng)其余細胞時不建議滅清。滅活非常容易產(chǎn)生沉淀,如必須滅活請按56℃,30 min,輕微搖晃原則操作,滅活溫度高、時間長、搖晃不均都容易產(chǎn)生沉淀。

Elisa試劑盒培養(yǎng)基:無培養(yǎng)基在結果重復性、細胞體外分化方面有優(yōu)勢,但是,仍然是培養(yǎng)液中基本的添加物,尤其是在原代培養(yǎng)或細胞生長狀態(tài)不良時,常常會先使用有的培養(yǎng)液進行培養(yǎng),待細胞生長旺盛后再換成培養(yǎng)液。



Elisa試劑盒——Elisa實驗常見問題及解決方案

重復性不佳,高CV值 

1  樣品不均一 加樣前充分混勻樣品,取樣確保移液位置一致;

2  包被板表面遭到破壞 洗板加樣時盡量小心,避免破壞板的包被表面

3  孔與孔之間的交叉污染 孵育后取下蓋子小心操作,避免孔與孔的污染;封板膜不能重復使用

4  加樣量不一致 樣品稀釋前應充分混勻,盡可能使用同一移液器并裝緊吸嘴

5  邊緣效應(外周孔顯色較中心孔深) 孵育時盡量100 rpm旋轉混勻

6  微量加樣不準確 保證微量加樣的準確性和均一性

7  不正確的洗滌 洗液準確配制;充分洗滌,靜置15秒,確定每一步的洗滌



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