低溫生物菌種的影響因素有哪些

菌的質(zhì)量：保藏的菌種應(yīng)培養(yǎng)在營(yíng)養(yǎng)豐富的條件下，使之進(jìn)入穩(wěn)定期，稍老一些的菌體對(duì)環(huán)境抵抗力強(qiáng)。另處，作為冷凍干燥的菌懸液細(xì)胞濃度要高不同的菌對(duì)冷凍干燥的耐受程度不同，如果保存的菌液細(xì)胞濃度不高，就會(huì)使以后傳種造成困難，保存期也會(huì)受到影響。

保護(hù)劑：不同種類的保護(hù)劑對(duì)不同微生物的作用是不同的，如個(gè)別菌種在脫脂乳作保護(hù)劑的情況下失敗率高達(dá)99.99%，而采用葡聚糖等混和保護(hù)劑時(shí)失敗率大大減少。一般情況下，那些容易保存的菌種對(duì)保護(hù)劑的要求不很嚴(yán)格，而不易保存的菌種對(duì)保護(hù)劑的要求卻很苛刻。因此，選擇好的保護(hù)劑是冷凍干燥保存菌種的關(guān)鍵因素。

干燥速度：實(shí)驗(yàn)表明，慢速干燥比快速干燥存活率高，如青霉菌6h干燥存活率為67.3%，而3h為59%。

空氣的影響：冷凍干燥后空氣對(duì)細(xì)菌細(xì)胞影響較大，可導(dǎo)致細(xì)胞損傷進(jìn)而失敗，故在凍干后應(yīng)立即在真空下融封，才有利于長(zhǎng)期保存。

溫度的影響：在干燥和真空狀況下溫度的影響遠(yuǎn)沒有上述幾項(xiàng)因素重要，因此可以在室溫下保存，但許多微生物在4℃保存的存活率要比在室溫下高1倍。

含水量的影響：水分含量過高對(duì)菌存活不利，完全脫水也不利于保存，一般把干燥后的細(xì)胞含水量控制在3%以下(1%-3%)

生物有機(jī)肥產(chǎn)品生產(chǎn)菌種使用現(xiàn)狀

細(xì)菌類生產(chǎn)用菌種除常見的芽孢外， 還出現(xiàn)了高地芽孢菌、 類干酪乳菌、 屎腸球菌、 鹽居固氮菌等新菌種， 其中， 高地芽孢菌和鹽居固氮菌普遍存在于土壤環(huán)境中， 未見致病性報(bào)道， 屬風(fēng)險(xiǎn)一級(jí)； 類干酪乳菌又名為副干酪乳菌， 雖為風(fēng)險(xiǎn)一級(jí) ， 但有從動(dòng)物受傷部位分離到該菌的報(bào)道；屎腸球菌屬于乳酸菌類，屬風(fēng)險(xiǎn)二級(jí)， 建議謹(jǐn)慎使用。伯克霍爾德氏菌是一些具有生物防治、 促進(jìn)植物生長(zhǎng)和生物修復(fù)等功能的細(xì)菌， 但同時(shí)也是可以引起鼻疽、 類鼻疽病的致病菌， 因此真菌伯克霍爾德氏菌屬于風(fēng)險(xiǎn)三級(jí)， 需做致病性試驗(yàn)， 建議慎用或不用。真菌類生產(chǎn)用菌株主要為絲狀真菌和酵母菌。哈茨木霉、 米曲霉、 淡紫紫孢菌、 長(zhǎng)枝木霉、 綠色木霉、 棘孢木霉、 黑曲霉、 粉紅螺旋聚孢霉、 金龜子綠僵菌等屬于生物安全風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)二級(jí)， 需按照NY/T 1109－2017 《微生物肥料生物安全通用技術(shù)準(zhǔn)則》 進(jìn)行毒理學(xué)測(cè)試。酵母菌主要以釀酒酵母為主， 還有少量東方伊薩酵母、杰丁塞伯林德納氏酵母 （原產(chǎn)朊假絲酵母、 杰丁畢赤酵母）、 膜醭畢赤酵母、 解脂耶羅威亞酵母等， 屬于生物安全風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)一級(jí)， 可免做毒理學(xué)試驗(yàn)。

                                                                什么是低溫生物菌種的保藏？

將需要保藏的菌種，接種在適宜的斜面培養(yǎng)基上，菌絲長(zhǎng)滿斜面時(shí)，用硫酸紙包扎棉塞或者硅膠塞，放置在4℃的冰箱中保藏，叫做斜面（菌種）低溫保藏法。由于微生物的新陳代謝活動(dòng)未停止，試管內(nèi)培養(yǎng)基易失水變干。因此，保藏時(shí)間較短，不適于長(zhǎng)期保藏。每隔3～6個(gè)月應(yīng)轉(zhuǎn)管一次。草菇菌種不耐低溫，需保藏在10～12℃之間?；蛟诓莨骄渖瞎嘧?～4毫升的防凍劑（10%的甘油）。當(dāng)菌絲長(zhǎng)滿斜面后，在無菌條件下，用無菌橡皮塞代替棉塞，并用石蠟密封，即可在室溫或冰箱中保藏。這種方法可防止雜菌污染，隔絕氧氣，避免培養(yǎng)基干燥，使用方便。據(jù)測(cè)定，保藏3年的菌種生活力仍很旺盛。