低溫生物菌種的影響因素有哪些

菌的質(zhì)量：保藏的菌種應(yīng)培養(yǎng)在營養(yǎng)豐富的條件下，使之進(jìn)入穩(wěn)定期，稍老一些的菌體對環(huán)境抵抗力強(qiáng)。另處，作為冷凍干燥的菌懸液細(xì)胞濃度要高不同的菌對冷凍干燥的耐受程度不同，如果保存的菌液細(xì)胞濃度不高，就會使以后傳種造成困難，保存期也會受到影響。

保護(hù)劑：不同種類的保護(hù)劑對不同微生物的作用是不同的，如個(gè)別菌種在脫脂乳作保護(hù)劑的情況下失敗率高達(dá)99.99%，而采用葡聚糖等混和保護(hù)劑時(shí)失敗率大大減少。一般情況下，那些容易保存的菌種對保護(hù)劑的要求不很嚴(yán)格，而不易保存的菌種對保護(hù)劑的要求卻很苛刻。因此，選擇好的保護(hù)劑是冷凍干燥保存菌種的關(guān)鍵因素。

干燥速度：實(shí)驗(yàn)表明，慢速干燥比快速干燥存活率高，如青霉菌6h干燥存活率為67.3%，而3h為59%。

空氣的影響：冷凍干燥后空氣對細(xì)菌細(xì)胞影響較大，可導(dǎo)致細(xì)胞損傷進(jìn)而失敗，故在凍干后應(yīng)立即在真空下融封，才有利于長期保存。

溫度的影響：在干燥和真空狀況下溫度的影響遠(yuǎn)沒有上述幾項(xiàng)因素重要，因此可以在室溫下保存，但許多微生物在4℃保存的存活率要比在室溫下高1倍。

含水量的影響：水分含量過高對菌存活不利，完全脫水也不利于保存，一般把干燥后的細(xì)胞含水量控制在3%以下(1%-3%)

低溫生物菌種的篩選分離

篩選：工業(yè)發(fā)酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩，挑選具有某種能力的有用菌種。

分離：首先是從土壤或腐生植物中收集含菌樣品，用無菌水稀釋后，涂布于置有適宜細(xì)菌、霉菌生長的瓊脂培養(yǎng)基平皿上，并將其倒置于恒溫箱中，培養(yǎng)一定時(shí)間，平皿上長出的許多單個(gè)菌落（單一微生物的集落）經(jīng)分別分離后即為各種純種菌株，簡稱純種，移種至試管斜面培養(yǎng)基上，置4℃冰箱備用。

篩選模型：根據(jù)不同的篩選目的，采用不同的篩選模型。如常規(guī)篩選菌種的方法是將土壤中分離所得的純種，在含有瓊脂培養(yǎng)基的平皿上培養(yǎng)后，用打孔器將菌塊移至含有試驗(yàn)菌的瓊脂培養(yǎng)基上，在適宜的溫度下培養(yǎng)一定時(shí)間后取出，如在菌塊的周圍有透明的抑菌圈，則表明此菌種具有產(chǎn)生抑制試驗(yàn)菌生長的菌種物質(zhì)的能力。所得菌種經(jīng)過搖瓶液體發(fā)酵，測定發(fā)酵液或菌絲體內(nèi)菌種的含量，選出生產(chǎn)能力高的菌種。另一方面對所提取的菌種進(jìn)行結(jié)構(gòu)分析、藥理試驗(yàn)及臨床試驗(yàn)等，確為有效者，即可作為生產(chǎn)菌種。又如篩選脂肪酶生產(chǎn)菌種的方法是將分離所得的霉菌涂布于含有牛脂的瓊脂培養(yǎng)基上，恒溫培養(yǎng)一定時(shí)間，如菌落周圍出現(xiàn)透明圈的，則該菌具有分解脂肪的能力，進(jìn)一步作搖瓶發(fā)酵測定酶活力，挑選產(chǎn)量高者作生產(chǎn)菌種的出發(fā)菌株。

                                                            低溫生物菌種烘干方法

微生物菌種低溫烘干裝置是用于對微生物菌種進(jìn)行烘干使用的裝置，通過產(chǎn)生較低的熱量，對微生物菌種進(jìn)行長時(shí)間的烘干，在不破壞微生物菌種的同時(shí)去除微生物菌種中的水分，廣泛的使用在微生物菌種的培育實(shí)驗(yàn)場合，而微生物菌種低溫烘干裝置已經(jīng)無法滿足人們的使用，需要更方便使用的微生物菌種低溫烘干裝置；在微生物菌種低溫烘干裝置使用時(shí)，無法對放置的微生物菌種進(jìn)行旋轉(zhuǎn)，導(dǎo)致了微生物菌種受熱面積不夠均衡，從而烘干的不夠徹底，同時(shí)，不能夠?qū)Ψ胖玫奈恢煤透叨冗M(jìn)行調(diào)整，從而不方便不同體積的微生物菌種器皿擺放進(jìn)行烘干。

                                                 低溫生物菌種的分離方法有哪些？

先將所需的種藥用真菌采集回來，選取新鮮、個(gè)體大、壯實(shí)、中齡及無病蟲害的子實(shí)體（或菌核、菌索），作為分離用的材料。若為子實(shí)體，取其菌蓋或菌柄組織；若為菌核，取其全部或部分（如茯苓）菌核；若為菌索，取其部分根狀菌索（如蜜環(huán)菌）。再用0.1 %或75 %酒精進(jìn)行表面消毒2 分鐘，用無菌水（或冷開水）沖洗數(shù)次，洗凈殘留的藥液后切成小塊。，然后，放入PDA 培養(yǎng)基的試管或培養(yǎng)皿上，置24 ～26℃溫度下，培養(yǎng)5 ～ 7 天。在分離的真菌組織周圍見長有白色菌絲時(shí)，應(yīng)及時(shí)將菌絲移至斜面試管培養(yǎng)基上，再置溫度24 ～26 ℃下培養(yǎng)7～10 天，即得純菌種。所得的純菌種還可繼續(xù)擴(kuò)大培養(yǎng)或保藏。