斜面菌種低溫保藏法對那些菌種能夠使用

此方法是很常用的，廣泛適用于細菌、酵母菌和霉菌等大多數(shù)微生物菌種的短期保藏及不宜用冷凍干燥保藏的菌種。

此方法的缺點是菌株仍有一定程度的代謝活動能力，保藏期短，傳代次數(shù)多，菌種較容易發(fā)生變異和被污染。

正常情況下的保菌期：霉菌和有芽孢的細菌一般可保存6個月左右，無芽孢的細菌可保存1個月左右，酵母菌可保存3個月左右。

如何對微生物菌種進行活化

1 定期移植法的菌種復(fù)蘇較簡單，直接轉(zhuǎn)接即可；

2 液體石蠟法保存的菌種在復(fù)蘇時，挑取少量菌體轉(zhuǎn)接在適宜的新鮮培養(yǎng)基上，生長繁殖后，再重新轉(zhuǎn)接一次；

3  沙土管法保存菌種在復(fù)蘇時，在無菌條件下打開沙土管，取部分沙土粒于適宜的斜面培養(yǎng)基上，長出菌落后再轉(zhuǎn)接一次?；蛉∩惩亮Ｓ谶m宜的液體培養(yǎng)基中，增殖培養(yǎng)后再轉(zhuǎn)接斜面；

4  真空冷凍干燥法保存菌種在復(fù)蘇時先用70%酒精棉花擦拭安瓿上部，將安瓿管頂部燒熱， 用無菌棉簽沾冷水，在頂部擦一圈，頂部出現(xiàn)裂紋，用挫刀或鑷子頸部輕叩一下，敲下已開裂的安瓿管的頂端，用無菌水或培養(yǎng)液溶解菌塊，使用無菌吸管移入新鮮培養(yǎng)基上，進行適溫培養(yǎng)；

5  -80℃ 冰箱凍結(jié)法保存菌種復(fù)蘇時，從冰箱中取出安瓿管或塑料凍存管，應(yīng)立即放置38℃-40℃水浴中快速復(fù)蘇并適當快速搖動。直到內(nèi)部結(jié)冰全部溶解為止，約需50秒-100秒。開啟安瓿管或塑料凍存管，將內(nèi)容物移至適宜的培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)

6  液氮超低溫凍結(jié)法保存菌種復(fù)蘇與-80℃ 冰箱凍結(jié)法保存菌種復(fù)蘇相似，從液氮罐中取出安瓿管或塑料凍存管，應(yīng)立即放置在38℃-40℃水浴中快速復(fù)蘇并適當搖動。直到內(nèi)部結(jié)冰全部溶解為止，一般約需50秒-100秒。開啟安瓿管或塑料凍存管，將內(nèi)容物移至適宜的培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)。

低溫生物菌種通用工藝包

生物的菌種產(chǎn)品在不同規(guī)模的小試和中試系統(tǒng)上進行過工藝開發(fā)與連續(xù)生產(chǎn)，已開發(fā)出在多種應(yīng)用場景下利用吉態(tài)來生物微生物菌種進行生產(chǎn)的通用工藝包。使用過的原料包括：合成氨弛放氣、焦爐煤氣、生物質(zhì)氣化氣、鋼瓶氣和工業(yè)等。產(chǎn)出的產(chǎn)物包括：飼料蛋白原料（魚粉替代物）、生物油脂（脂肪酸）、生物柴油（脂肪酸甲酯）等大宗原料或產(chǎn)物，以及蛋白酶、DHA等高附加值產(chǎn)物。中試實現(xiàn)連續(xù)運行、穩(wěn)定生產(chǎn)。該通用工藝包采用模塊化設(shè)計，其中模塊A為吉態(tài)來生物的菌種產(chǎn)品，B/C/D為對應(yīng)的發(fā)酵模塊、原料預(yù)處理模塊以及產(chǎn)物后處理模塊。工程企業(yè)可直接使用該工藝包進一步優(yōu)化，或在此基礎(chǔ)上為業(yè)主提供工程項目的定制解決方案

低溫生物菌種的篩選分離

篩選：工業(yè)發(fā)酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩，挑選具有某種能力的有用菌種。

分離：首先是從土壤或腐生植物中收集含菌樣品，用無菌水稀釋后，涂布于置有適宜細菌、霉菌生長的瓊脂培養(yǎng)基平皿上，并將其倒置于恒溫箱中，培養(yǎng)一定時間，平皿上長出的許多單個菌落（單一微生物的集落）經(jīng)分別分離后即為各種純種菌株，簡稱純種，移種至試管斜面培養(yǎng)基上，置4℃冰箱備用。

篩選模型：根據(jù)不同的篩選目的，采用不同的篩選模型。如常規(guī)篩選菌種的方法是將土壤中分離所得的純種，在含有瓊脂培養(yǎng)基的平皿上培養(yǎng)后，用打孔器將菌塊移至含有試驗菌的瓊脂培養(yǎng)基上，在適宜的溫度下培養(yǎng)一定時間后取出，如在菌塊的周圍有透明的抑菌圈，則表明此菌種具有產(chǎn)生抑制試驗菌生長的菌種物質(zhì)的能力。所得菌種經(jīng)過搖瓶液體發(fā)酵，測定發(fā)酵液或菌絲體內(nèi)菌種的含量，選出生產(chǎn)能力高的菌種。另一方面對所提取的菌種進行結(jié)構(gòu)分析、藥理試驗及臨床試驗等，確為有效者，即可作為生產(chǎn)菌種。又如篩選脂肪酶生產(chǎn)菌種的方法是將分離所得的霉菌涂布于含有牛脂的瓊脂培養(yǎng)基上，恒溫培養(yǎng)一定時間，如菌落周圍出現(xiàn)透明圈的，則該菌具有分解脂肪的能力，進一步作搖瓶發(fā)酵測定酶活力，挑選產(chǎn)量高者作生產(chǎn)菌種的出發(fā)菌株。