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低溫生物菌種的影響因素有哪些
菌的質(zhì)量:保藏的菌種應培養(yǎng)在營養(yǎng)豐富的條件下,使之進入穩(wěn)定期,稍老一些的菌體對環(huán)境抵抗力強。另處,作為冷凍干燥的菌懸液細胞濃度要高不同的菌對冷凍干燥的耐受程度不同,如果保存的菌液細胞濃度不高,就會使以后傳種造成困難,保存期也會受到影響。
保護劑:不同種類的保護劑對不同微生物的作用是不同的,如個別菌種在脫脂乳作保護劑的情況下失敗率高達99.99%,而采用葡聚糖等混和保護劑時失敗率大大減少。一般情況下,那些容易保存的菌種對保護劑的要求不很嚴格,而不易保存的菌種對保護劑的要求卻很苛刻。因此,選擇好的保護劑是冷凍干燥保存菌種的關鍵因素。
干燥速度:實驗表明,慢速干燥比快速干燥存活率高,如青霉菌6h干燥存活率為67.3%,而3h為59%。
空氣的影響:冷凍干燥后空氣對細菌細胞影響較大,可導致細胞損傷進而失敗,故在凍干后應立即在真空下融封,才有利于長期保存。
溫度的影響:在干燥和真空狀況下溫度的影響遠沒有上述幾項因素重要,因此可以在室溫下保存,但許多微生物在4℃保存的存活率要比在室溫下高1倍。
含水量的影響:水分含量過高對菌存活不利,完全脫水也不利于保存,一般把干燥后的細胞含水量控制在3%以下(1%-3%)
低溫生物菌種的工藝介紹
現(xiàn)有生化工藝有活性污泥法、生物接觸氧化、MBBR、MBR等,這些工藝在常溫下均可實現(xiàn)氨氮的有效去除并達標,這時好氧系統(tǒng)中占主導地位的是中溫(微生物)硝化菌,硝化菌分自養(yǎng)硝化細菌和異樣硝化菌。
自養(yǎng)硝化菌生長繁殖緩慢,在活性污泥系統(tǒng)中無法與異養(yǎng)細菌競爭,難以維持較高的細胞濃度,需要保持較長的污泥停留時間來取得較好的脫氮效果,易受外界環(huán)境影響,對環(huán)境沖擊尤其是毒物沖擊非常敏感,硝化系統(tǒng)很容易崩潰,要經(jīng)常不斷的馴化和培養(yǎng)。
低溫生物菌種的使用溫度
普通硝化細菌在溫度低于15°C時,活性大幅度降低,硝化速度也明顯下降,溫度低于5°C時,普通硝化細菌的生命活動幾乎停止,處于休眠狀態(tài),普通中溫微生物適合生長溫度為25~37℃,目前污水處理廠的處理工藝大都可實現(xiàn)15°C左右氨氮達標排放,當溫度低于12°C時,中溫菌的活性大大降低,甚至沒有繁殖功能,使得污水廠COD、氨氮和磷處理效果變差,出水無法達標排放,投加COD去除劑,氨氮去除劑,除磷劑等化學絮凝劑或氧化劑,在增加污水廠運營成本的同時,又形成了二次污染。
低溫生物菌種的保存方法有哪些?
(一)培養(yǎng)基保存法
利用各種斜面和半固體培養(yǎng)基,加上石蠟油保存菌種,是一種簡易的保存方法。
1.普通瓊脂斜面保存法:腸道菌、等一般細菌可接種于不含糖的普通瓊脂斜面上,斜面底部應加少許無糖肉膏湯,以防干涸。經(jīng)35℃培養(yǎng)18~24h后,移種于4℃冰箱中,一般可保存一個月,每月傳代一次。
2.血液瓊脂斜面保存法:鏈球菌、應接種于血液瓊脂斜面上,35℃培養(yǎng)生長后,置4℃冰箱中保存,鏈球菌須半個月至1個月移種一次,新分離菌株須2~4天移種一次,以后逐漸延長移種時間,在適應后可延至半個月移種一次。
3.巧克力色斜面保存法:宜保存菌,并在35℃孵箱中保存,一般每2天移種一次。
4.雞蛋斜面保存法:適于保存含有Vi抗原的沙門菌屬及其他含表面抗原的細菌,一般可保存一個月。
5.半固體穿刺保存法:將細菌接種于瓊脂半固體或瓊脂半固體內(nèi),經(jīng)35℃培養(yǎng)18~24h,再以無菌方法加入滅菌的液體石蠟。高度約lcm,置4℃冰箱保存。保存時間可達3~6個月。
(二)干燥保存法
原理是將細菌體內(nèi)的水分蒸發(fā)掉,使其處于休眠和代謝停滯狀態(tài),從而達到長期保存菌種的目的醫(yī)|學教|育網(wǎng)搜集整理。菌種干燥后低溫保存,可保存數(shù)年至十幾年。
(三)冷凍干燥保存法
本法又稱冷凍真空干燥法。它綜合利用了各種有利于菌種保存的因素(低溫、干燥和缺氧等),是目前有效的菌種保存方法之一。用本法保存的菌種具有成活率高,變異性小等優(yōu)點,保存期一般3~5年,有的可長達10年以上。
(四)脫脂牛奶保存法
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