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廣州碩譜生物科技有限公司mcx固相萃取柱品牌
溶劑環(huán)境的pH怎么影響化合物在小柱上的保留,為什么我們要關(guān)注化合物的pKa值,在C18小柱中需要考慮這些因素嗎?
我們來說一下,Ka指的是酸度系數(shù),又名酸離解常數(shù),可以理解為酸離解H離子的能力,而pKa=-lgKa,對于酸,在環(huán)境pH下存在如下平衡:左邊的A-/HA,實際是指溶劑環(huán)境下,離子態(tài)和分子態(tài)的比例,右邊反映了左側(cè)兩者的轉(zhuǎn)化關(guān)系,取決于(pH-pKa)的數(shù)值大小。對于離子交換小柱,保持目標(biāo)物的離子化而非分子態(tài),是一個關(guān)鍵點,這對于離子交換作用機理的交換柱,將直接關(guān)系到其實驗成敗。而對于硅膠鍵合C18小柱的萃取,由于硅膠(—SiOH)不能完全“封端”,在pH大于4.0的情況下,硅膠都會帶上負電荷,因而會使得能電離的化合物與硅膠作用,增強了這種附帶的次級作用理(主作用力為非極性相互作用力),而使得此類物質(zhì)在硅膠-C18上的保留增強,若只考慮C18的非極性作用力,必然會導(dǎo)致回收結(jié)果的不盡人意。
固相萃?。⊿olid Phase Extraction,簡稱SPE),也稱固相提取,是一項結(jié)合了選擇性保留、選擇性洗脫等過程的分離技術(shù)。 SPE也是一個柱色譜分離過程,分離機理、固定相和溶劑的選擇等方面與高1效液相色譜(HPLC)有許多相似之處。
SPE是一種吸附劑萃取,樣品通過填充吸附劑的一次性萃取柱,分析物和雜質(zhì)被保留在柱上,然后分別用選擇性溶劑去除雜質(zhì),洗脫出分析物,從而達到分離的目的。
PE的凈化模式主要取決于填充劑的類型和溶劑的性質(zhì)
中性氧化鋁,酸性氧化鋁、堿性氧化鋁,怎么區(qū)分?
Al2O3 的主要作用力是通過金屬鋁中心與化合物的羥基形成氫鍵來吸附,或者通過離子交換作用。中性氧化鋁(Al-N):pH為6.5,中性氧化鋁主要通過鋁原子中心與帶有高負電荷的雜原子作用,如:N、O、P、S及富電子的芳香族化合物。
先理解酸化后和堿化后的氧化鋁,氧化鋁的性能變化:
Al2O3 6HCl = 2AlCl3 3H2O;
Al2O3 2NaOH= 2NaAlO2(偏鋁酸鈉) H2O
酸化的氧化鋁和堿化的氧化鋁,使得氧化鋁表面的電荷性發(fā)生改變,如酸性氧化鋁帶正電荷的中心容易吸附陰離子,并且產(chǎn)生偶極作用,吸附極性化合物;而堿性則吸附極性和含陽離子官能的化合物。
固相萃?。⊿PE)技術(shù)做為樣品處理的一種重要的方法廣泛應(yīng)用于臨床醫(yī)學(xué)、制藥、食品、環(huán)境等領(lǐng)域。
實驗室中常用的固相萃取常用方法:
? 重力
? 價格便宜,速度慢,完全靠重力沒法保證結(jié)果的一致性
? 真空抽濾
? 常用的方法(目前)
? 不支持高1性能的柱子(微粒經(jīng)填料)
? 不適用粘稠樣本和粘性樣品
? 流速不均一
? 離心
? 不常規(guī),不適用于體積超過100微升的樣品
? 正壓
? 變得越來越普遍
? 流速方便控制且均一
? 提供更高的壓力
? 更容易實現(xiàn)自動化
柱子在什么情況下可以清洗一下篩板呢?原來也討論過這個問題,我也拆下來清洗過,但我看到柱前段的污染更甚,于是就用刀片刮了刮,然后把清洗好的篩板安裝上去。問題解決了,但使用壽命會不會減少呢?
答:柱頭污染了,就取出污染的,再裝一些填料。因為加入你刮了些填料,那么微觀的塔板數(shù)就少了。假入你刮得不多,僅表面,可能就是一些臟物,所以,問題解決。但是今后還會有同樣問題,再掛,那么不小心刮,影響柱效。建議還是裝一個預(yù)柱。