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Elisa試劑盒的優(yōu)點
1.特異性強:不與其它細胞反應(yīng)。
2.重復(fù)性好:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
3.穩(wěn)定性高:實驗效果很穩(wěn)定。
4.超靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品,稀釋度和樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
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Elisa試劑盒原理及用途
本試劑盒采用間接競爭ELISA方法檢測肌肉組織、牛奶等樣品中的米松(Dexamethasone,DEX),試劑盒由預(yù)包被偶聯(lián)抗原的酶標(biāo)板、酶標(biāo)記物、、標(biāo)準(zhǔn)品及其他配套試劑組成。檢測時,加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品溶液,樣本中的米松藥品和酶標(biāo)板上預(yù)包被偶聯(lián)抗原競爭抗米松藥類,加入酶標(biāo)記物后,用TMB底物顯色,樣本吸光度值與其所含米松藥品含量成負相關(guān),與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出樣本中米松藥品的殘留量。
Elisa試劑盒的安全性
8. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
2. 洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
3. 底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
4. 加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
5. 按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
Elisa試劑盒——Elisa實驗常見問題及解決方案
重復(fù)性不佳,高CV值
1 樣品不均一 加樣前充分混勻樣品,取樣確保移液位置一致;
2 包被板表面遭到破壞 洗板加樣時盡量小心,避免破壞板的包被表面
3 孔與孔之間的交叉污染 孵育后取下蓋子小心操作,避免孔與孔的污染;封板膜不能重復(fù)使用
4 加樣量不一致 樣品稀釋前應(yīng)充分混勻,盡可能使用同一移液器并裝緊吸嘴
5 邊緣效應(yīng)(外周孔顯色較中心孔深) 孵育時盡量100 rpm旋轉(zhuǎn)混勻
6 微量加樣不準(zhǔn)確 保證微量加樣的準(zhǔn)確性和均一性
7 不正確的洗滌 洗液準(zhǔn)確配制;充分洗滌,靜置15秒,確定每一步的洗滌