廣州碩譜生物科技有限公司氨丙基SPE柱選擇

SPE應(yīng)用 - 水產(chǎn)品中苯并(a)芘的測定

“苯并(a) 芘”是一種多環(huán)芳香族碳?xì)浠衔?，對人類基因有害，并會致癌。目前，我國對常見食物中苯并芘的限量?biāo)準(zhǔn)為：肉制品、糧食的食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)為5μg/kg 以下，植物油為10μg/kg 以下，熏烤動物性食品為5μg/kg 以下。

GB 5009.27—2011 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中苯并（a）芘的測定中，采用去活的氧化鋁層析柱進(jìn)行油脂中苯并（a）芘測定的前處理，使用溶劑多， 耗時長，方法較繁瑣。

本方法采用上海安譜科學(xué)儀器有限公司開發(fā)的BAP 苯并(a) 芘 專用 SPE 小柱，克服了國標(biāo)方法的缺點(diǎn)。

SPE法適用范圍

適用于食品中 PG、THBP、TBHQ、NDGA、BHA、Ionox-100、OG、DG、BHT 九種抗1氧化劑的測定。

參考標(biāo)準(zhǔn)：

《GB 5009.32-2016 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中9種抗1氧化劑的測定》

SPE法原理

油樣用乙1腈提取，固相萃取柱凈化。

固相萃取操作中常見的問題

回收率低在一次完整的SPE操作中，目標(biāo)化合物可能會存在于樣品溶液流出液、淋洗液、洗脫液或吸附劑中，當(dāng)“目標(biāo)物沒有回收或回收率低” 現(xiàn)象發(fā)生時，可向樣品溶液加入標(biāo)液，然后進(jìn)行完整的SPE操作并將樣品流出液、淋洗液和洗脫液分別收集并分析。

首先確定目標(biāo)化合物存在于哪一部分，進(jìn)而確定問題來自下列哪一環(huán)節(jié)：目標(biāo)化合物在吸附劑上保留不足；目標(biāo)化合物未被完全洗脫；其他環(huán)節(jié)。

由于許多化合物同時具有多種官能團(tuán)，在選擇固相萃取機(jī)理時，應(yīng)該根據(jù)目標(biāo)化合物及干擾物的性質(zhì)來考慮采用哪種萃取機(jī)理較為有利。如：2-萘胺是一個弱堿性化合物（pKa=4.16），在一定的pH條件下還可以呈陽離子狀態(tài)，同時該化合物具有疏水的非極性官能團(tuán)及親水的極性官能團(tuán)。這時，就應(yīng)該根據(jù)樣品基質(zhì)的具體情況來選擇有利于將目標(biāo)化合物與干擾物分離的萃取機(jī)理。如果樣品基質(zhì)中同時含有大量的非極性干擾雜質(zhì)，就應(yīng)該避免采用非極性的萃取機(jī)理，而將樣品的pH調(diào)節(jié)到低于其pKa兩個pH單位，即pH=2.16，并采用陽離子交換機(jī)理。反之，如果樣品中同時含有大量的陽離子干擾雜質(zhì)，則應(yīng)該調(diào)節(jié)樣品的pH至6.16（高于pKa兩個單位），采用非極性萃取機(jī)理較為有利。

離子交換固相萃取小柱方法開發(fā)中需要注意的問題。

離子交換固相萃取適用于可解離成帶電離子的化合物，其機(jī)理是利用帶電荷的目標(biāo)化合物離子與帶相反電荷的吸附劑之間的靜電吸引力。樣品基質(zhì)可以是極性的，如水溶液，也可以是非極性的有機(jī)溶液，但在實(shí)際應(yīng)用中以水溶液較多，包括生物體液、江河湖海等自然水、廢水等。

常見反相鍵合硅膠吸附劑的類型

C18柱

C18是目前使用zui多的一種SPE柱，根據(jù)2003年的一項(xiàng)統(tǒng)計，在所有使用

的SPE柱中，C18柱占了56％左右。C18柱的主要官能團(tuán)是十八烷基( octade-cyl),其主要作用力是非極性，第二作用力是極性、陽離子交換。在所有鍵合硅

膠SPE吸附劑中，C18柱的非極性吸附能力zui強(qiáng)。因此，強(qiáng)非極性化合物被C18

吸附后可能較難洗脫。C18難吸附極性非常強(qiáng)的分子，如碳水化合物( carbohy

-drates).C18一般被當(dāng)作zui沒有選擇性或通用型的吸附劑，因?yàn)榻^大多數(shù)有機(jī)分子或多或少含有非極性基團(tuán)，C18可以從水溶液中吸附這些有機(jī)化合物。因此C18對于同時分離不同結(jié)構(gòu)的化合物時較為適用。由于C18的選擇性較低，其zui終萃取物往往沒有其他選擇性高的填料那么干凈。在蛋白質(zhì)純化中，C18柱是優(yōu)1秀的除鹽工具，因?yàn)闃悠分械柠}在C18柱上沒有保留。C18的極性副作用力比其他鍵合硅膠SPE吸附劑低許多，主要是碳鏈較長的原因。