廣州碩譜生物科技有限公司聚合物SPE類型

SPE小柱的填料裝實(shí)后，當(dāng)通過(guò)小柱的流速較低時(shí)，液體是以層流的方式通過(guò)填料層，將填料層浸潤(rùn)充分，濕潤(rùn)的液面截層逐級(jí)向前推進(jìn)，見附圖；當(dāng)流速過(guò)大的時(shí)候，而柱床厚度較高時(shí)，可能會(huì)在填料內(nèi)部形成溝渠通道，液流將通過(guò)溝渠，快速通過(guò)小柱，而使得填料的浸潤(rùn)變得不充分，這樣將使得體與填料的接觸面積大大降低，嚴(yán)重影響填料對(duì)目標(biāo)物質(zhì)的保留效果。

鑒于大部分化合物都具有多種功能基團(tuán)，在實(shí)際操作中，主要根據(jù)目標(biāo)物和干擾物的性質(zhì)考慮采用何種萃取機(jī)理。例如：2-萘胺為弱堿性化合物(pKa=4.16)，在一定 pH條件下可呈陽(yáng)離子化狀態(tài)，同時(shí)又具有疏水和親水基。此時(shí)可根據(jù)樣品基質(zhì)選擇有利于目標(biāo)物與干擾物分離的萃取機(jī)理。在目標(biāo)物處于極性較弱的樣品基質(zhì)中時(shí)，可利用極性相互作用，選擇正相萃取方式；而在極性樣品環(huán)境下，則可采用反相萃取方式。采用陽(yáng)離子交換機(jī)制，可將萃取過(guò)程中 pH調(diào)至低于目標(biāo)物 pKa的兩個(gè) pH單位，即 pH=2.16。

離子交換固相萃取小柱方法開發(fā)中需要注意的問(wèn)題。

離子交換固相萃取適用于可解離成帶電離子的化合物，其機(jī)理是利用帶電荷的目標(biāo)化合物離子與帶相反電荷的吸附劑之間的靜電吸引力。樣品基質(zhì)可以是極性的，如水溶液，也可以是非極性的有機(jī)溶液，但在實(shí)際應(yīng)用中以水溶液較多，包括生物體液、江河湖海等自然水、廢水等。

常見反相鍵合硅膠吸附劑的類型

C18柱

C18是目前使用zui多的一種SPE柱，根據(jù)2003年的一項(xiàng)統(tǒng)計(jì)，在所有使用

的SPE柱中，C18柱占了56％左右。C18柱的主要官能團(tuán)是十八烷基( octade-cyl),其主要作用力是非極性，第二作用力是極性、陽(yáng)離子交換。在所有鍵合硅

膠SPE吸附劑中，C18柱的非極性吸附能力zui強(qiáng)。因此，強(qiáng)非極性化合物被C18

吸附后可能較難洗脫。C18難吸附極性非常強(qiáng)的分子，如碳水化合物( carbohy

-drates).C18一般被當(dāng)作zui沒(méi)有選擇性或通用型的吸附劑，因?yàn)榻^大多數(shù)有機(jī)分子或多或少含有非極性基團(tuán)，C18可以從水溶液中吸附這些有機(jī)化合物。因此C18對(duì)于同時(shí)分離不同結(jié)構(gòu)的化合物時(shí)較為適用。由于C18的選擇性較低，其zui終萃取物往往沒(méi)有其他選擇性高的填料那么干凈。在蛋白質(zhì)純化中，C18柱是優(yōu)1秀的除鹽工具，因?yàn)闃悠分械柠}在C18柱上沒(méi)有保留。C18的極性副作用力比其他鍵合硅膠SPE吸附劑低許多，主要是碳鏈較長(zhǎng)的原因。