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被測(cè)樣品顆粒顆粒在液相系統(tǒng)中的第二個(gè)來源是試樣。有些實(shí)驗(yàn)室把樣品放入自動(dòng)采樣盤(或人工進(jìn)樣)之前，首先要經(jīng)過一個(gè)0.45μ m針筒式過濾器過濾。這種方法可以有效地去除樣品中的微粒。但這一過程要注意一點(diǎn)：你用了針筒過濾器，不可能100%獲得經(jīng)過過濾器測(cè)試的樣品，總會(huì)有或多或少的損失。損失源于以下幾個(gè)方面：過濾器過濾膜的吸附、過濾器濾出微粒的吸附、針筒濾膜過濾器與針筒連接處的滲漏等。

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如有丟失，過濾后的液體中被測(cè)物的含量或濃度是否與原始樣液的含量或濃度相同？這通常需要通過實(shí)驗(yàn)加以證實(shí)。確定此步驟會(huì)增加工作量和成本。過濾是一種消耗，每臺(tái)過濾器的價(jià)格從幾元到十幾元。但是在分析食品中的殘留物時(shí)，由于底物大多比較復(fù)雜，因此過濾這一步就成為的步驟。實(shí)踐分析工作中，一般檢測(cè)每組樣品都要配外標(biāo)、加回收或質(zhì)控樣品，所以只要檢測(cè)得到的信噪比達(dá)到檢出限要求，就可以認(rèn)為這一步可以作為系統(tǒng)誤差而忽略。

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無過濾相的流動(dòng)…由于柱塞、密封環(huán)、氣缸體和單向閥等雜質(zhì)顆粒都會(huì)磨損，因此，應(yīng)該在流動(dòng)相中預(yù)先除去任何固體顆粒。好的流動(dòng)相是在玻璃容器中蒸餾，而通常的過濾方法是濾過，可以使用 Millipore濾膜(0.2μ m或0.45μ m)等過濾器。泵入口處應(yīng)接砂濾棒(或片)。應(yīng)該經(jīng)常清洗或更換輸液泵的濾器。泵用后不能及時(shí)清洗移動(dòng)相中不得含有腐蝕性物質(zhì)，含有緩沖液的流動(dòng)相不能留在泵中，特別是當(dāng)泵停泵過夜或更久時(shí)。若含有緩沖液的流動(dòng)相留在泵中，可能會(huì)析出鹽的微晶，如上述固體顆粒那樣損壞密封環(huán)和柱塞，甚至只是因?yàn)槿芤禾幱陟o止?fàn)顟B(tài)時(shí)，會(huì)析出。所以，必須用純水將泵完全清洗干凈，然后換成適合于保存色譜柱和有利于泵維護(hù)的溶劑(對(duì)于反相鍵合硅膠固定相，可能是或-水)。

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可流動(dòng)相消失…水泵工作時(shí)要注意防止溶劑瓶?jī)?nèi)的流動(dòng)相被用完，否則泵運(yùn)轉(zhuǎn)也會(huì)磨損柱塞、氣缸或密封環(huán)，終造成泄漏。如果沒有流動(dòng)相的外流，沒有壓力指示怎么辦？也許是泵內(nèi)有大量的氣體，此時(shí)可開啟泄壓閥，使泵在較大流量(如5 ml/min)下運(yùn)轉(zhuǎn)，排出氣泡，也可用一個(gè)50ml的針筒在泵出口協(xié)助抽氣。另外一個(gè)可能的原因是密封環(huán)磨損需要更換。

調(diào)整流量過快…防止壓力、溫度急劇變化和機(jī)械振動(dòng)。氣溫驟降或使色譜柱從高處落下，都會(huì)影響柱內(nèi)填充狀態(tài)；柱壓突然升高或降低，也會(huì)對(duì)柱內(nèi)填充物產(chǎn)生沖力，所以在調(diào)節(jié)流速時(shí)要緩慢進(jìn)行，在閥進(jìn)樣時(shí)閥的轉(zhuǎn)動(dòng)不能過緩(如前面所述)。反向色譜柱…一般情況下，色譜柱不能反沖，只有生產(chǎn)者指示柱可以反沖時(shí)，才能反沖去除留在柱頭的雜質(zhì)。反之，反向?qū)⒀杆俳档椭?。預(yù)加保護(hù)柱為了避免破壞固定相，應(yīng)選擇合適的流動(dòng)相(特別是 pH)。有時(shí)候，一預(yù)柱可以在進(jìn)樣器前連接，分析柱是硅膠粘合時(shí)，預(yù)柱為硅膠，可使流動(dòng)相在進(jìn)入分析柱前先被硅膠“飽和”，避免分析柱中的硅膠基質(zhì)溶解。

不要把復(fù)雜的樣品，特別是生物樣品直接注入到柱中，需要對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理，或者在進(jìn)樣器與色譜柱之間連接一個(gè)保護(hù)柱。保護(hù)柱一般為填充具有相似固定相的短柱。可以也應(yīng)該經(jīng)常更換保護(hù)柱。【前輩經(jīng)驗(yàn)】如何排除小概率故障？【1】泵壓跳動(dòng)，跳動(dòng)范圍約10 bar。對(duì)策：原來的小白頭有點(diǎn)臟，換了以后還沒有解決；2、將主動(dòng)閥上的閥芯取出，發(fā)現(xiàn)類似于氣泡的存在，在超聲5分鐘內(nèi)浸入-水溶液中試著除去氣泡，重新安裝后觀察，仍未解決；更換新閥芯，安裝完畢后，再也沒有跳動(dòng)，觀察一段時(shí)間后比較平穩(wěn)，順利解決。