解淀粉芽孢桿菌濃縮菌粉施用

解淀粉芽孢桿菌是一株具有廣譜抗病抑菌作用的生，能夠有效抑制或緩解小麥紋枯病、棉花枯萎病、棉花紅腐病、棉花黃萎病、黃瓜灰霉病和疫病、油菜和芹菜的菌核病、稻瘟病、辣椒枯萎病、山藥根腐病、蘋果病、輪紋病、腐爛病、褐斑病等各類植物的病害發(fā)生。

解淀粉芽孢桿菌濃縮菌粉施用后在土壤中能夠快速的大量繁衍和定植，能夠有效的排斥和阻止植物病原菌對(duì)植株的侵染；但Jerzsele等[35]的研究表明：解淀粉芽孢桿菌對(duì)人工產(chǎn)氣莢膜梭菌而引起的肉雞壞死性的無顯著效果，說明不同的解淀粉芽孢桿菌菌株抑菌能力和作用效果存在差異。同時(shí)分泌胞外代謝產(chǎn)物直接或抑制病原菌的生長繁殖，解淀粉芽孢桿菌吸附在病原菌的菌體上，產(chǎn)生溶解物質(zhì)消解菌絲體和細(xì)胞壁，使菌體發(fā)生斷裂、解體、細(xì)胞壁穿孔、畸形起到溶解作用；可誘發(fā)植物自身的抗病潛能提高增強(qiáng)植物的抗病性，促使植物自身大量分泌生，從而促進(jìn)植物的生長繁殖，增產(chǎn)增收。

全基因組脫氧核糖核酸(deoxyribonucleicacid,DNA)的提

菌株的鑒定：對(duì)篩選得到的乳酸菌進(jìn)行16S rDNA序列分析，確定其種屬。將活化好的菌液，進(jìn)行菌株的全基因組脫氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid, DNA)的提取[16]，然后對(duì)基因組DNA的16S rDNA區(qū)域進(jìn)行PCR擴(kuò)增，上游引物27F序列5′-AGAGTTTGATCCTGGCCTCA-3′，下游引物1492R序列：5′-GGTTACCTTGTTACGACTT-3′，擴(kuò)增片段為1 500 bp。PCR體系50 μL：10×buffer 5 μL；脫氧核糖核苷酸三磷酸(deoxy-ribonucleoside triphosphate, dNTP) 5 μL；解淀粉芽孢桿菌K6對(duì)藤黃微球菌(Micrococcuslu-teus)、大腸桿菌(Escherichiacoli)均有抑制作用。上游引物(25 μmol/L)0.5 μL；下游引物(25 μmol/L)0.5 μL；Taq DNA 聚合酶(250 U)0.5 μL；模板DNA 1.5 μL ；ddH2O 37 μL。PCR擴(kuò)增條件為：95 ℃ 3 min；95 ℃ 10 s；55 ℃ 30 s；72 ℃ 1 min；72 ℃ 5 min，2～4反應(yīng)步驟進(jìn)行30個(gè)循環(huán)。擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳檢測其純度及濃度，將達(dá)到測序要求的擴(kuò)增產(chǎn)物送至上海華大基因進(jìn)行測序，將測序結(jié)果在美國國立生物技術(shù)信息中心(national center for biotechnology information, NCBI)上BLAST進(jìn)行比對(duì)，并確定其種屬。

復(fù)合微生物肥料、生物有機(jī)肥內(nèi)含的多種功能性

復(fù)合微生物肥料、生物有機(jī)肥內(nèi)含的多種功能性微生物進(jìn)入土壤后，在生長繁殖過程中產(chǎn)生大量的次生代謝產(chǎn)物，這些產(chǎn)物能夠促進(jìn)土壤團(tuán)粒結(jié)構(gòu)的形成。團(tuán)粒結(jié)構(gòu)的形成使土壤變得疏松、綿軟，保水保肥性能增強(qiáng)，水、氣、熱更加協(xié)調(diào)，減少土壤板結(jié)，有利于保水、保肥、通氣和促進(jìn)根系發(fā)展，為農(nóng)作物提供舒適的生長環(huán)境。González-Ortiz等[34]研究了解淀粉芽孢桿菌CECT5940和屎腸球菌CECT4515(添加量均為0。土壤理化性狀的改善，加強(qiáng)了土壤有益微生物的活動(dòng)，從而較大限度促使有機(jī)物分解轉(zhuǎn)化，產(chǎn)生多種營養(yǎng)物質(zhì)和刺激性物質(zhì)，反過來又刺激微生物的生長發(fā)育，促進(jìn)作物生長，而達(dá)到增產(chǎn)增收的目的。另外，功能性微生物在作物根系周圍形成優(yōu)勢種群，抑制或拮抗有害病原菌的生長繁殖，減輕了作物發(fā)生病害的程度，進(jìn)而起到增加產(chǎn)量的目的。