ELISA試劑盒的制備方法

包括以下步驟：

1)抗原表位的計(jì)算機(jī)篩選；

2)抗原的制備；

3)采集；

4)間接ELISA方法的建立；

5)間接ELISA方法的敏感性和特異性驗(yàn)證；

6)試劑盒的穩(wěn)定性驗(yàn)證；

7)對(duì)屠宰場(chǎng)進(jìn)行臨床檢測(cè)。該方法簡單、快速、靈敏度高、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性合格、重復(fù)性好。應(yīng)用本發(fā)明制得的試劑盒能有效檢出戊型病毒，適用于大批量發(fā)病樣本的檢測(cè)，可用于豬戊肝的快速診斷，并預(yù)防、控制豬戊病毒的流行和阻斷戊病毒由豬向人傳播。

ELISA試劑盒的組成結(jié)構(gòu)

1、 操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2、 血漿：EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

3、 細(xì)胞上清液：1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4、 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液。

5、 保存：如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

此IBL試劑盒能用于小鼠清,EDTA血漿,細(xì)胞上清中白介素-6的定量檢測(cè)。

Elisa試劑盒的優(yōu)點(diǎn)

1．特異性強(qiáng)：不與其它細(xì)胞反應(yīng)。

2．重復(fù)性好：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

3．穩(wěn)定性高：實(shí)驗(yàn)效果很穩(wěn)定。

4．超靈敏度：zui小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品，稀釋度和樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。

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