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對照測試:于反應(yīng)瓶中加入2.5mL緩沖液,再分別加入100μL酶液和顯色劑,混勻,靜置反應(yīng)10min后加入100μL(或20μL)底物,搖勻并立即倒入比色杯中,及時放入儀器的測量室通道,合上蓋。按〈B〉鍵,顯示屏下方延遲10s后,測量時間開始,計時完畢,顯示屏顯示吸光度增量(ΔΑ0)及抑制率。農(nóng)殘試劑結(jié)果判定方法:與空白對照卡比較,白色藥片不變色或略有淺藍色均為陽性結(jié)果,不變藍為強陽性結(jié)果,說明農(nóng)藥殘留量較高,顯淺藍色為弱陽性結(jié)果,說明農(nóng)藥殘留量相對較低。在進行對照測試時,2~8通道可同時進行樣品測試。
樣品前處理及對照液、檢測樣品液的制備:
1) 對照液的制備:取酶100ul,蔬菜農(nóng)藥殘留檢測儀,緩沖液2.5ml,加入專用反應(yīng)瓶中,混勻,再加入顯色劑100ul,底物20ul。搖勻后立即轉(zhuǎn)移到比色皿中農(nóng)殘試劑,放入儀器進行對照測試。
2) 檢測樣品液的制備:
a.取2g茶葉樣品放入三角瓶中,加入10ml緩沖液,快速農(nóng)藥殘留檢測儀, 振蕩提取2分鐘后過濾,取出清液即為待測試液。
b.取酶100ul,待測試液2.5ml,加入專用反應(yīng)瓶中,混勻靜置抑制10分鐘后,(按儀器顯示的時間計時)加入顯色劑 100ul,底物 20ul 。搖勻后立即轉(zhuǎn)移到比色皿中農(nóng)殘試劑。
目前農(nóng)藥殘留快速檢測方法種類繁多,究其原理來說主要分為兩大類:生化測定法和色譜檢測法。其中生化測定法中的酶抑制率法由于具有快速、靈敏、操作簡便、成本低廉等特點。
酶試劑使用前請搖晃均勻。使用時用一瓶取一瓶,用完再取用新的,要防止其它物質(zhì)的污染,以免溶液失效,未用完的試劑可放在清洗干凈的反應(yīng)瓶中0~5oC環(huán)境條件下保存。反應(yīng)瓶建議用去污粉清洗,盡可能不用洗潔精清洗。為保證酶活性,未開封試劑應(yīng)盡量使用冷凍柜保存,開封試劑應(yīng)盡量使用4℃冷鮮柜保存。(去污粉可在一般的日雜商站或***化學試劑商店買到。)