蛋白質(zhì)晶體板介紹使用

通過(guò)紅外光譜,掃描電鏡,X射線衍射對(duì)產(chǎn)物的晶型,形貌及物相進(jìn)行了詳細(xì)表征,初步探討了文石晶體形成機(jī)理及生長(zhǎng)機(jī)理。本文研究的主要內(nèi)容及所獲得的結(jié)論如下:1.常溫常壓下,以竹蟶韌帶纖維狀蛋白質(zhì)為基底,采用氣體擴(kuò)散法可以在較大的條件范圍內(nèi)合成出純文石晶體:即稀硫酸濃度0.1mol-L-1,NH4HCO3粉末19.0g,CaCl2濃度0.9-9.0mmol·L-1,溶液高度10-30mm,反應(yīng)溫度20-30℃,結(jié)晶時(shí)間3-12小時(shí)。而空白對(duì)照(以玻璃蓋玻片為基底)制備出的晶體主要為菱形方解石,還有少量文石和球文石。

新型蛋白質(zhì)結(jié)晶板

本實(shí)用新型公開(kāi)了一種新型的蛋白質(zhì)結(jié)晶板,包括頂部結(jié)晶板和下端結(jié)晶板,所述頂部結(jié)晶板安裝固定在下端結(jié)晶板的上端位置上,所述頂部結(jié)晶板的上端中間設(shè)置有陣列凹槽,通過(guò)結(jié)晶板外殼,內(nèi)部?jī)?chǔ)槽和滴液凹槽所組成的三孔結(jié)晶板可以很好的滿足特定的使用需要,三孔結(jié)晶板的結(jié)晶板外殼連接在頂部結(jié)晶板上,從而可以很好的固定連接住。

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蛋白質(zhì)晶體板

半胱氨酸、賴氨酸的蛋白質(zhì)、以及含有金屬離子的蛋白質(zhì)。這些蛋白質(zhì)的吸附會(huì)導(dǎo)致重組蛋白質(zhì)純度大幅降低。為了解決這一問(wèn)題,我們制備了兩類新材料,用于提高重組蛋白質(zhì)純度:1)通過(guò)分子印跡技術(shù),以組氨酸標(biāo)簽為模板,在IMAC材料表面形成組氨酸標(biāo)簽的分子印跡層,使得不含組氨酸標(biāo)簽的蛋白質(zhì)無(wú)法靠近IMAC材料,從而提高重組蛋白純度;2)通過(guò)活性可控自由基聚合,在IMAC基質(zhì)材料表面包被了一層尺寸可控的聚合物涂層。在聚合物網(wǎng)絡(luò)的篩分作用下,進(jìn)而實(shí)現(xiàn)帶組氨酸標(biāo)簽的重組蛋白的純化。

蛋白結(jié)晶板

盡管近些年來(lái)在蛋白質(zhì)結(jié)晶的理論、方法和技術(shù)上已取得巨大發(fā)展,獲得衍射良好的蛋白質(zhì)晶體仍然是利用X-射線解析蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的一個(gè)主要瓶頸問(wèn)題。這里我們發(fā)展了一種新型的蛋白質(zhì)結(jié)晶方法—固液界面方法,即SLIM。該方法主要包括兩個(gè)部分1)預(yù)先加入并干燥蛋白質(zhì)母液;2)進(jìn)行晶體生長(zhǎng)的時(shí)候,直接將蛋白質(zhì)溶液加入'干母液'中,從而產(chǎn)生一個(gè)固體(干母液)和液體(蛋白質(zhì)溶液)的界面。該方法不僅操作簡(jiǎn)單、快速,而且降低了對(duì)蛋白質(zhì)溶液濃度的要求。