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博日冷凍食品加工公司核酸提取純化詢問(wèn)報(bào)價(jià)

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發(fā)布時(shí)間:2020-11-17 06:19  






廣州勱博儀器有限公司產(chǎn)品服務(wù)包括:非洲病毒檢測(cè)、核酸提取純化、PCR、熒光定量PCR、檢測(cè)、非洲檢測(cè)、全自動(dòng)核酸提取純化系統(tǒng)、病毒核酸提取系統(tǒng)、非洲病毒快速檢測(cè)試劑盒。但磁珠法由于磁珠吸附DNA分子的不均衡、且在后續(xù)洗脫過(guò)程中會(huì)造成核酸的斷裂和損失,因此在疑難檢材的檢驗(yàn)過(guò)程中,存在PCR擴(kuò)增失敗,DNA檢驗(yàn)不成功的情況。我們的客戶對(duì)象是食品企業(yè)/公司/廠、食品加工企業(yè)/公司/廠、冷凍食品加工企業(yè)/公司/廠、養(yǎng)殖場(chǎng)、養(yǎng)豬場(chǎng)、屠宰場(chǎng)、生豬屠宰場(chǎng)。

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一、在動(dòng)物檢疫中對(duì)生豬及其產(chǎn)品開(kāi)展非洲病毒檢測(cè),應(yīng)當(dāng)使用我部批準(zhǔn)或經(jīng)中國(guó)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心比對(duì)符合要求的檢測(cè)方法及檢測(cè)試劑盒(試紙條),確保檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確。廣州勱博--養(yǎng)殖場(chǎng)熒光定量PCR相對(duì)常規(guī)PCR而言,熒光定量PCR的主要優(yōu)點(diǎn)是準(zhǔn)確地確定初始模板拷貝數(shù)和寬的動(dòng)態(tài)范圍內(nèi)和高的靈敏度。符合要求的檢測(cè)方法及檢測(cè)試劑盒(試紙條)可從中國(guó)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心網(wǎng)站查詢。二、應(yīng)急期間,比對(duì)符合要求的檢測(cè)試劑盒(試紙條)可使用至2019年6月30日。三、各地畜牧獸醫(yī)管理部門要加強(qiáng)對(duì)非洲病毒檢測(cè)試劑盒(試紙條)生產(chǎn)企業(yè)及其產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)管,確保產(chǎn)品質(zhì)量符合要求。


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豬肉制品加工企業(yè)在生豬產(chǎn)品原料中檢出非洲病毒核酸陽(yáng)性的,應(yīng)當(dāng)立即封存陽(yáng)性樣品的同批次原料并報(bào)告所在地市場(chǎng)監(jiān)管、畜牧獸醫(yī)部門,并將陽(yáng)性樣品送至具有檢測(cè)資質(zhì)的單位復(fù)檢。廣州勱博--養(yǎng)殖場(chǎng)PCRPCR檢測(cè)同熒光PCR類似,都是使用的引物和探針以VP72編碼區(qū)域作為靶基因設(shè)計(jì),該基因研究清楚,且高度保守,即使在滅活或降解的樣品中也可檢測(cè)到已知所有22種p72病毒基因型的多個(gè)毒株。復(fù)檢為陽(yáng)性的,企業(yè)要在當(dāng)?shù)厥袌?chǎng)監(jiān)管、畜牧獸醫(yī)部門監(jiān)督下,按規(guī)定對(duì)同批次生豬產(chǎn)品原料進(jìn)行無(wú)害化處理,對(duì)相關(guān)場(chǎng)所進(jìn)行徹i底清洗消毒。


廣州勱博儀器有限公司產(chǎn)品服務(wù)包括:非洲病毒檢測(cè)、核酸提取純化、PCR、熒光定量PCR、檢測(cè)、非洲檢測(cè)、全自動(dòng)核酸提取純化系統(tǒng)、病毒核酸提取系統(tǒng)、非洲病毒快速檢測(cè)試劑盒。實(shí)時(shí)熒光定量PCR(real-timequantitativePCR,RQPCR)技術(shù)實(shí)現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍,它以其特異性強(qiáng)、靈敏度高、重復(fù)性好、定量準(zhǔn)確、速度快、全封閉反應(yīng)等優(yōu)點(diǎn)成為分子生物學(xué)研究中的重要工具。我們的客戶對(duì)象是食品企業(yè)/公司/廠、食品加工企業(yè)/公司/廠、冷凍食品加工企業(yè)/公司/廠、養(yǎng)殖場(chǎng)、養(yǎng)豬場(chǎng)、屠宰場(chǎng)、生豬屠宰場(chǎng)。

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在real-time Q-PCR技術(shù)中,無(wú)論是相對(duì)定量還是標(biāo)準(zhǔn)曲線定量方法仍存在一些PCR定量方法均有的問(wèn)題有待解決。在標(biāo)準(zhǔn)曲線定量中,標(biāo)準(zhǔn)品的制備是一個(gè)必不可少的過(guò)程。目前由于無(wú)一統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn),各個(gè)實(shí)驗(yàn)室所用的生成標(biāo)準(zhǔn)曲線的樣品各不相同,致使實(shí)驗(yàn)結(jié)果缺乏可比性。在不使用時(shí)蓋住接收坑,有效地控制害蟲(chóng),防止灰塵收集系統(tǒng)中的灰塵再循環(huán)回到飼料中,并管理好整個(gè)工廠的人員移動(dòng)。此外,用real-time Q-PCR來(lái)研究mRNA時(shí),受到不同RNA樣本存在不同的逆轉(zhuǎn)錄(RT)效率的限制。在相對(duì)定量中,其前提是假設(shè)內(nèi)源控制物不受實(shí)驗(yàn)條件的影響的,合理地選擇合適的不受實(shí)驗(yàn)條件影響的內(nèi)源控制物也是實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠與否的關(guān)鍵。

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與傳統(tǒng)的PCR技術(shù)相比,Real-time Q-PCR的不足之處是:(1)由于運(yùn)用了封閉的檢測(cè),減少了擴(kuò)增后電泳的檢測(cè)步驟,因此也就不能監(jiān)測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物的大?。簧i屠宰廠(場(chǎng))連接著生豬產(chǎn)銷等上下游環(huán)節(jié),便于“順藤摸瓜”及時(shí)發(fā)現(xiàn)和追溯潛在風(fēng)險(xiǎn)。(2)因?yàn)闊晒馑胤N類以及檢測(cè)光源的局限性,從而相對(duì)地限制了real-time Q-PCR的復(fù)合式(multiplex)檢測(cè)的應(yīng)用能力;(3)目前real-time Q-PCR實(shí)驗(yàn)成本比較高,從而也限制了其廣泛的應(yīng)用。


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根據(jù)動(dòng)物防疫法及其配套規(guī)章規(guī)定,縣級(jí)動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督機(jī)構(gòu)依法向屠宰場(chǎng)派駐(出)官i方獸醫(yī)實(shí)施屠宰檢疫。按照生豬屠宰檢疫規(guī)程和相關(guān)規(guī)定,屠宰檢疫內(nèi)容包括傳i染病和寄i生蟲(chóng)病,檢疫流程包括生豬進(jìn)入屠宰廠(場(chǎng)、點(diǎn))監(jiān)督查驗(yàn)、檢疫申報(bào)、宰前檢查、同步檢疫、檢疫結(jié)果處理以及檢疫記錄等。廣州勱博--屠宰場(chǎng)核酸提取純化一般情況下,高溫消毒時(shí),60℃就可以將多數(shù)病原殺滅,但汽i油噴燈溫度達(dá)幾百度,噴燈火焰一掃而過(guò),也不會(huì)殺滅病原,因時(shí)間太短。在非洲防控期間,官i方獸醫(yī)監(jiān)督屠宰企業(yè)開(kāi)展非洲自檢,對(duì)沒(méi)有開(kāi)展自檢的屠宰企業(yè),對(duì)屠宰后的生豬產(chǎn)品一律不得出具動(dòng)物檢疫證明。

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實(shí)時(shí)熒光定量PCR(real-time quantitativePCR)/QRT-PCR,是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光標(biāo)記物,利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過(guò)擴(kuò)增曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。一般用于mRNA轉(zhuǎn)錄水平的定量研究、不同樣本或基因組中DNA拷貝數(shù)的測(cè)定、基因芯片結(jié)果驗(yàn)證、藥i效分析等。為了定量和比較的方便,在實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念:熒光閾值和CT值。金開(kāi)瑞采用SYBR熒光染料法及TaqMan探針?lè)ㄟM(jìn)行熒光定量PCR檢測(cè),從引物設(shè)計(jì)到檢測(cè)一次性完成,提供2種常用的內(nèi)參引物及免費(fèi)的專業(yè)數(shù)據(jù)分析,每個(gè)樣品設(shè)置至少三個(gè)平行對(duì)照,保證結(jié)果的準(zhǔn)確可靠。


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FQ-PCR在醫(yī)學(xué)栓測(cè)中有價(jià)值的應(yīng)用領(lǐng)城就是對(duì)感i染性疾病的診斷,只要有限的核酸序列清楚,運(yùn)用FQ-PCR技術(shù),檢測(cè)任何病原體。目前,對(duì)一些培養(yǎng)周期長(zhǎng)或缺乏穩(wěn)定可靠的檢測(cè)手段的病原體,可以考慮用FQ-PCR檢測(cè),為臨床診斷提供依據(jù)FQ-PCR對(duì)病原體的檢測(cè)克服了免i疫學(xué)檢測(cè)的“窗口期“問(wèn)題,可判斷疾病是否隱性或亞臨床狀態(tài)。根據(jù)檢測(cè)結(jié)果,對(duì)發(fā)生疫情的地方嚴(yán)防死守,對(duì)疫點(diǎn)地區(qū)生豬全部撲殺,進(jìn)行無(wú)害化處理,防止疫情的擴(kuò)散。FQ-PCR技術(shù)可以應(yīng)用于腫癟的研究及診斷。

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實(shí)時(shí)熒光定量PCR的基本原理:理論上,PCR過(guò)程是按照2n(n代表PCR循環(huán)的次數(shù))指數(shù)的方式進(jìn)行模板的擴(kuò)增。但在實(shí)際的PCR反應(yīng)過(guò)程中,隨著反應(yīng)的進(jìn)行由于體系中各成分的消耗(主要是由于聚合酶活力的衰減)使得靶序列并非按指數(shù)方式擴(kuò)增,而是按線性的方式增長(zhǎng)進(jìn)入平臺(tái)期。離心后混合液體將分為下層的紅色酚氯i仿相,中間層以及無(wú)色水相上層。因此在起始模板量與終點(diǎn)的熒光信號(hào)強(qiáng)度間沒(méi)有可靠的相關(guān)性。如采用常規(guī)的終點(diǎn)檢測(cè)法(利用EB染色來(lái)判斷擴(kuò)增產(chǎn)物的多少,從而間接的判斷起始拷貝量),即使起始模板量相同經(jīng)PCR擴(kuò)增、EB染色后也完全有可能得到不同的終點(diǎn)熒光信號(hào)強(qiáng)度。



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