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拉曼光譜技術的優(yōu)越性
提供快速、簡單、可重復、且更重要的是無損傷的定性定量分析,它無需樣品準備,樣品可直接通過光纖探頭或者通過玻璃、石英、和光纖測量,此外。。。
①由于水的拉曼散射很微弱,拉曼光譜是研究水溶液中的生物樣品和化學化合物的理想工具。
②拉曼一次可以同時覆蓋50~4000波數(shù)的區(qū)間,可對有機物及無機物進行分析。相反,若讓紅外光譜覆蓋相同的區(qū)間則必須改變光柵、光束分離器、濾波器和檢測器。。。
③拉曼光譜譜峰清晰尖銳,更適合定量研究、數(shù)據(jù)庫搜索、以及運用差異分析進行定性研究。在化學結構分析中,獨立的拉曼區(qū)間的強度可以和功能集團的數(shù)量相關。
④因為激光束的直徑在它的聚焦部位通常只有0.2~2毫米,常規(guī)拉曼光譜只需要少量的樣品就可以得到。這是拉曼光譜相對常規(guī)紅外光譜一個很大的優(yōu)勢,而且拉曼顯微鏡物鏡可將激光束進一步聚焦至20微米甚至更小,可分析更小面積的樣品。
⑤共振拉曼效應可以用來有選擇性地增強大生物分子特個發(fā)色基團的振動,這些發(fā)色基團的拉曼光強能被選擇性地增強1000到10000倍。
便攜式拉曼光譜儀關鍵部件
一臺完整的拉曼光譜儀通常由激光器(光源)、樣品外光路、色散系統(tǒng)、信號接收系統(tǒng)和信息處理系統(tǒng)幾大部分組成。相對于好的實驗室系統(tǒng),便攜式拉曼設備的內部部件更簡單且模塊化程度更高,其關鍵的零部件包括光源模塊、光譜儀模塊以及拉曼探頭三樣。國產拉曼采用的光譜儀相較進口產品存在一定差距,主要體現(xiàn)在光譜分辨率、噪聲控制等方面。在激光光源模塊領域,國內外拉曼大部分選用的激光器在體積和能量方面基本一致,主要在線寬和輸出穩(wěn)定方面存在差異。但僅針對便攜式拉曼設備的應用來說,以上幾個關鍵部件國內外廠商的技術水平相差已經不大,國產產品正在靠近國外同類產品的水平。
為什么測試時一些光譜給出十分強的背景信號,而這些信號湮蓋了拉曼信號?
一些發(fā)熒光或磷光的樣品在測量時會給出非常高的背景光譜。令人遺憾的是這些是樣品材料的本征性質,是激光輻照下無法避免的結果,而且通常情況下熒光比拉曼信號更強。盡管這樣,我們仍可采取一些措施減少或減輕熒光副作用。
猝滅:一些樣品可采用測試前將激光輻照在表面一段時間對熒光進行猝滅以減小熒光光譜的背景增強拉曼信號。猝滅的時間根據(jù)樣品不同可從幾分鐘到幾小時。值得注意的是:猝滅效應是呈指數(shù)衰減的,一開始就可觀察到。
共焦模式:采用共焦模式測量強光下輻照的小體積樣品時熒光將會大大降低。該法也同樣適合有熒光襯底的樣品,例如被熒光物質基體包裹的樣品。
改變激發(fā)激光的波長:有時改變波長是僅有可行的避免熒光干擾的方法。
如果拉曼實驗室里有太多的室內光源比如熒光、白熾燈或日光燈等,這會在測試光譜上出現(xiàn)不必要的背景信號。因此在測試的時候應將室內光關閉或降到很小或用遮光罩將樣品臺罩住以避免外界的雜散光進入光譜儀。