熒光定量PCR儀的原理

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為了便于對所檢測樣本進行比較，在real-time Q-PCR反應(yīng)的指數(shù)期，首先需設(shè)定一定熒光信號的域值，一般這個域值（threshold）是以PCR反應(yīng)的前15個循環(huán)的熒光信號作為熒光本底信號 （baseline），熒光域值的缺省設(shè)置是3～15個循環(huán)的熒光信號的標(biāo)準(zhǔn)偏差的10倍。如果檢測到熒光信號超過域值被認為是真正的信號，它可用于定義 樣本的域值循環(huán)數(shù)（Ct）。

熒光定量PCR的病原體檢測

目前，采用熒光定量PCR檢測技術(shù)可以對解脲支原體、人類瘤病毒、單純病毒、肝的病毒、病毒、EB病毒和巨細胞病毒等病原體進行定量測定。與傳統(tǒng)的檢測方法相比具有靈敏度高、取樣少、快速簡便等優(yōu)點。如：菌基因診斷的意義主要表現(xiàn)在：a.區(qū)分TB；b.檢測TB耐藥基因；c.提高TB的陽性檢出率。

熒光定量PCR儀的產(chǎn)前診斷應(yīng)用

到目前為止，人們對遺傳性物質(zhì)改變引起的遺傳性疾病還無法治，只能通過產(chǎn)前監(jiān)測，減少病嬰出生，以防止各類遺傳性疾病的發(fā)生，如為減少X連鎖遺傳病患兒的出生，從孕婦的外周血中分離胎兒DNA，用實時熒光定量PCR檢測其Y性別決定區(qū)基因是一種無創(chuàng)傷性的方法，易為孕婦所接受。