降低水力停留時間至20h，待其穩(wěn)定運行，出水COD的去除率穩(wěn)定在80%時，觀察厭氧反應(yīng)器內(nèi)厭氧顆粒污泥情況。經(jīng)過分析，制備的厭氧顆粒污泥要以甲1烷八疊球菌類型為主，同時存在少量絲狀菌與桿1菌，外觀直徑以2-3mm為主。通過判斷，厭氧反應(yīng)器內(nèi)厭氧顆粒污泥的二次培養(yǎng)成功。繼續(xù)運行3個月，厭氧反應(yīng)器COD去除率穩(wěn)定(達(dá)90%以上)，無任何酸化等現(xiàn)象， 產(chǎn)氣量及組分均很穩(wěn)定，運行正常。經(jīng)過分析，制備的厭氧顆粒污泥要以甲1烷八疊球菌類型為主，同時存在少量絲狀菌與桿1菌，外觀直徑以2-3mm為主。

實驗研究表明，由絮狀污泥作為種泥的初次啟動時，有機(jī)負(fù)荷率在0.2～0.4 kgCOD/(kgVSS?d)和污泥負(fù)荷率在0.1～0.25kgCOD/(kgVSS?d)時，有利于顆粒污泥的形成。在污泥顆?；^程中進(jìn)水堿度可以適當(dāng)偏高(但不能使反應(yīng)器體系的pH>8.2，這主要是因為此時產(chǎn)甲1烷菌會受到嚴(yán)重抑制)以加速污泥的顆粒化，使反應(yīng)器快速啟動；實驗研究表明，由絮狀污泥作為種泥的初次啟動時，有機(jī)負(fù)荷率在0。而在顆?；^程基本結(jié)束時，進(jìn)水堿度應(yīng)適當(dāng)偏低以提高顆粒污泥的產(chǎn)甲1烷活性。

不同特性的廢水進(jìn)入反應(yīng)器后對pH值的影響也不同 ,例如含碳水化合物的廢水會引起pH值的降低 ,而含大量蛋白質(zhì)和氨基酸的廢水則會造成pH值上升。因而 ,進(jìn)液時廢水可有不同的pH值 ,關(guān)鍵是保證進(jìn)液后pH值的穩(wěn)定 ,使廢水有一定的緩沖能力 ,防止酸積累對甲1烷菌產(chǎn)生毒性影響。在操作過程中出水回流不僅在反應(yīng)器啟動階段提供反應(yīng)器一定的水力負(fù)荷 ,且由于出水堿度高于進(jìn)水堿度 ,可增加廢水的緩沖能力 ,減少化學(xué)物質(zhì)的添加。不論何種原因?qū)е路磻?yīng)溫度的短期突變，對厭氧發(fā)酵過程均有明顯的影響。