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HPLC定性分析的主要方法與技術(shù)。

使用保留值定性方法

在所有定性分析方法中， HPLC使用保留值定性分析的方法是基本的方法，他就是合理地運用色譜的一些基本知識對有機化合物所作的反應(yīng)，從而得出有機化合物應(yīng)具有的性質(zhì)。HPLC中，兩種相同的物質(zhì)在同一色譜中應(yīng)具有相同的保留值，因此， HPLC中的定性分析就能充分地應(yīng)用到這一原理，用相同的色譜對未知物質(zhì)進行簡單的成分和性質(zhì)判斷，同時在同一物質(zhì)組分下色譜上形成的未知峰保留值也是一樣的，這樣就可以初步判定未知有機化合物。HPLC的流動相在此基礎(chǔ)上，適當改變流動相來判斷未知有機化合物的基本性質(zhì)，而在連續(xù)變化的過程中，當發(fā)現(xiàn)兩個保留值峰值相同時，我們可以簡單地判斷為未知有機化合物的性質(zhì)相同。盡管 HPLC的保留值定性分析方法可以區(qū)分同樣的物理性質(zhì)，但不能保證具有相同保留值的兩個有機化合物是同一種物質(zhì)，因此在實際應(yīng)用中， HPLC利用保留值定性分析的方法雖然簡單，而且很具操作性，但適用范圍較窄，不能適應(yīng)更多未知有機化合物的性質(zhì)判定。

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液相色譜定性分析方法優(yōu)化

1.改進儀器的質(zhì)量和效率

在精密液相色譜定性分析過程中，對液相色譜的綜合性能要求很高，因此，在液相色譜定性分析的過程中，有關(guān)人員應(yīng)加強對儀器質(zhì)量的要求，通過一套高質(zhì)量的精密儀器，在液相色譜定性分析過程中才能采集到更為合理的數(shù)據(jù)，并保證液相色譜定性分析過程中的準確性。

2.改進液相色譜標準物項

此外，還可以有效解決保留值定性分析方法存在的缺陷。在長期的液相色譜定性分析中，有關(guān)人員對其進行了大量的文獻報道，因此，在液相色譜保留值定性分析的過程中，可根據(jù)現(xiàn)有的文獻數(shù)據(jù)和對照選擇已知標準物品進行定性分析，這樣就可以在液相色譜保留值定性分析中，有效地解決了液相色譜保留值定性分析中仍存在未知物質(zhì)的缺陷。

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色譜法是一種色譜法。層析法有兩種相，一相為流動相，另一相為固定相。如液體為流動相，則稱為液相色譜，而流動相為氣體，稱為氣相色譜。

氣體色譜法的優(yōu)點：

①分選效i率高，分析速度快，如能在2小時內(nèi)將汽i油樣品分離出200多個色譜峰，一般分析樣品20分種即可完成。

②氣樣用量少，檢測靈敏度高，如氣樣用量1毫升，液體樣品用量0.1微升固體樣品的用量為幾微克。使用合適的檢測儀可以檢測到百萬分之十到十億分之一的雜質(zhì)。

③選擇性好，可分離、分析恒沸混合物，具有相似沸點的物質(zhì)、某些同位素、順式異構(gòu)體鄰、間、對位異構(gòu)體、旋光異構(gòu)體等。

④適用范圍廣，雖然主要用于各種氣體及易揮發(fā)有機物的分析，但在一定條件下，還可對高沸物和固體樣品進行分析。主要應(yīng)用領(lǐng)域為石油工業(yè)、環(huán)境保護、臨床化學、制藥和食品工業(yè)。

質(zhì)譜儀簡介：

質(zhì)譜主要由離子源、質(zhì)量分析儀和離子探測器組成。離子源是在高真空條件下使樣品分子離子化的裝置。離子化的分子在接受了過多的能量之后，進一步碎裂成各種碎片、小顆粒和中性顆粒。當加速電場作用下，它們得到平均動能相等時，它們進入質(zhì)量分析儀。質(zhì)量儀是一種將同一時間進入不同質(zhì)量的離子，并按 m/e大小分離的裝置。分出的離子依次進入離子檢測器，采集放大的離子信號，通過計算機處理，繪制成質(zhì)譜。離子源、質(zhì)量分析儀和離子檢測器各有不同的種類。根據(jù)應(yīng)用范圍，質(zhì)譜儀分為同位素質(zhì)譜儀、無機質(zhì)譜儀和有機質(zhì)譜儀，根據(jù)分辨能力分為高分辨、中、低分辨率三種；按工作原理分為靜態(tài)儀器和動態(tài)儀器。

使用方法：

隔離和檢測同位素的儀器。該儀器的主要設(shè)備是在真空中。不同質(zhì)量的離子被氣化、離子束，經(jīng)電壓加速、聚焦，然后經(jīng)過磁場電場區(qū)，不同質(zhì)量的離子被不同位置聚焦，從而得到不同同位素的質(zhì)量譜。1913年 J. J.湯姆孫確定質(zhì)譜方法，此后又通過等人改進和完善。在不斷改進的現(xiàn)代質(zhì)譜儀中，仍然利用電磁學原理，將離子束按荷質(zhì)比分離。質(zhì)譜的性能指標是其分辨率，如果質(zhì)譜儀正好可以分辨質(zhì)量 m和 m Δ m，分辨率定義為 m/Δ m。其分辨率達到105~106量級，可以準確地測量出原子的質(zhì)量，使其在小數(shù)點后7位。