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洋蔥亞細(xì)胞定位公司電話「思特進(jìn)」

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發(fā)布時(shí)間:2021-08-04 09:29  






武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);激光共聚焦結(jié)果顯示侵染了只含GFP載體的農(nóng)的細(xì)胞,可在細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)中檢測(cè)到GFP的綠色熒光,而侵染了含核定位信號(hào)FMF:GFP和GFP:FMF2種融合蛋白載體的農(nóng)的細(xì)胞,只在細(xì)胞核中觀察到綠色熒光??梢蚤_展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。





由稻瘟菌(Magnaporthe grisea)引起的稻瘟病是重要的水稻病害之一。以研究稻瘟菌致病基因?yàn)橹行?探討致病相關(guān)基因的種類及其功能,生理小種和致病基因的關(guān)系,致病基因的遺傳分離和在群體中的轉(zhuǎn)移規(guī)律等等,能夠?yàn)樗究刮列匝芯亢偷疚敛』瘜W(xué)防治、生物防治提供理論基礎(chǔ)。 本研究利用在實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)建成的根癌農(nóng)介導(dǎo)的稻瘟菌T-DNA插入突變體庫,挑選了7個(gè)致病力缺陷的突變體,提取基因組DNA,PCR檢測(cè)確認(rèn)T-DNA的插入。利用DW-ACP-PCR(DNA Walking-Annealing Control Primer-PCR)技術(shù)對(duì)T-DNA右邊界側(cè)翼序列進(jìn)行擴(kuò)增,7個(gè)突變體都獲得了特異條帶。對(duì)這些特異條帶進(jìn)行并測(cè)序,其中5個(gè)測(cè)序成功,另外2個(gè)測(cè)序失敗。方法首先采用Western印跡方法檢測(cè)過表達(dá)MAGI3后E-cadherin蛋白表達(dá)條帶的遷移變化,。將成功的序列與稻瘟菌基因組和NCBI數(shù)據(jù)庫比對(duì),發(fā)現(xiàn)1個(gè)為載體pCAMBIA1300序列,4個(gè)與稻瘟菌的基因組相似性達(dá)93%~99%,認(rèn)為是T-DNA插入位點(diǎn)的側(cè)翼序列。


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脂肪族昔(aliphatic glucosinolates, AGSL)是一種廣泛存在于十字花科植物中的含氮、含硫的植物次生代謝產(chǎn)物,其降解產(chǎn)物(如蘿卜硫素)不僅在植物防御、響應(yīng)生物或非生物脅迫的生理過程中具有重要的作用,而且還具有極強(qiáng)的活性。MYB28和MYB29是調(diào)控脂肪族GSL生物合成的兩類重要轉(zhuǎn)錄因子。在擬南芥中MYB28和MYB29直接調(diào)控脂肪族苷的合成。在十字花科蔬菜中,青花菜中的苷含量較為豐富,成分更為復(fù)雜,目前國內(nèi)外對(duì)青花菜AGSL生物合成途徑中的結(jié)構(gòu)基因研究的較多,而對(duì)其中起調(diào)控作用的轉(zhuǎn)錄因子的研究則相對(duì)較為滯后。Bra1編碼蛋白的氨基酸序列中包含有BAHD?;D(zhuǎn)移酶家族特有的HXXXD功能區(qū)以及DFGWG保守結(jié)構(gòu)域,說明Bra1基因是BAHD酰基轉(zhuǎn)移酶基因家族的一個(gè)成員。


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采用根癌農(nóng)介導(dǎo)的方法,以農(nóng)介導(dǎo)絲狀真菌遺傳轉(zhuǎn)化的載體PCH-sGFP對(duì)尖孢鐮刀菌甘藍(lán)?;蛢蓚€(gè)生理小種進(jìn)行轉(zhuǎn)化,該載體含有報(bào)告基因—綠色熒光蛋白基因(gfp)和篩選基因—潮磷酸轉(zhuǎn)移酶基因(hph).獲得轉(zhuǎn)化菌株后,經(jīng)檢測(cè)表明:T-DNA目的片段成功整合到枯萎病菌基因組中,并且單孢繼代培養(yǎng)6代后熒光蛋白仍能穩(wěn)定遺傳.對(duì)轉(zhuǎn)化菌株的生長(zhǎng)速度和致病力進(jìn)行分析,結(jié)果表明:菌株和轉(zhuǎn)化菌株在生長(zhǎng)速度和致病力上沒有顯著差異.因此,轉(zhuǎn)化菌株可用于甘藍(lán)枯萎病菌的組織病理學(xué)研究.


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