組織研磨機(jī)的工作原理

組織研磨機(jī)是一款名副其實(shí)的實(shí)驗(yàn)室多功能樣品制備儀器，是專(zhuān)門(mén)為“少量樣品”而推出的新產(chǎn)品。高通量組織研磨機(jī)可在1-3分鐘內(nèi)對(duì)硬性、軟性、彈性等樣品進(jìn)行快速有效的干磨或濕磨，亦可達(dá)到對(duì)粉體及混濁液混合、均相化的目的，還可以進(jìn)行低溫液氮冷凍研磨，也可以進(jìn)行生物細(xì)胞破碎和DNA/RNA提取。高通量組織研磨機(jī)可研磨的樣品種類(lèi)包括：植物組織、動(dòng)物組織、細(xì)胞、細(xì)菌、芽孢和酵母等。工作原理：將樣品研磨球放入研磨容器內(nèi)（如研磨罐或離心管/適配器），在高頻擺動(dòng)作用下，研磨球在研磨容器內(nèi)來(lái)回高速撞擊及摩擦，在幾秒到幾分鐘內(nèi)輕松實(shí)現(xiàn)樣品的研磨、粉碎、混合及細(xì)胞破壁。

組織研磨儀的操作步驟及注意事項(xiàng)

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      1.   將處理好的樣本、研磨球依次加入離心管中；

2.   將裝好樣品的離心管放入適配器中；

3.   將帶有樣品的適配器放入液氮中冷凍數(shù)分鐘；

4.   將冷凍后的樣品和適配器放在夾具中間，調(diào)整好位置；

5.   將夾具放在樣品臺(tái)上，定位槽定位，旋緊垂直定位旋鈕，安全鎖歸位；

6.   蓋上機(jī)器的安全門(mén)；

7.   設(shè)置振動(dòng)頻率、振動(dòng)時(shí)間；

8.   啟動(dòng)機(jī)器，執(zhí)行破碎過(guò)程；

9.   等待機(jī)器完全停止振動(dòng)后關(guān)機(jī)，打開(kāi)安全門(mén)，取出樣品；

10.  儀器歸位。

注意事項(xiàng)：1.   儀器應(yīng)放置于干燥通風(fēng)的環(huán)境中使用；

2.   樣品對(duì)稱(chēng)分布于樣品夾中，確保樣品夾平衡；

3.   關(guān)閉安全門(mén)前需確認(rèn)夾具已完全固定，無(wú)松動(dòng)現(xiàn)象；

4.   設(shè)置振蕩頻率時(shí)不得超過(guò)**量程1800次/min；

5.   對(duì)樣品進(jìn)行冷凍時(shí)，應(yīng)注意防止液氮濺出，造成傷害。

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DNA的粗提

1) 將高通量組織研磨儀研磨好的樣品取出于65℃水浴45min，中途間隔（輕柔）振蕩三次混勻；

2) 冷卻后加入等體積：易戊醇（24：1），輕柔顛倒混勻使乳化10min；

3) 7000g-8000g離心10min（18-20℃）；

4) 吸取上清于另一干凈的離心管中；

5) （根據(jù)需要可用氯放：易戊醇如上法重復(fù)抽提一次，吸取上清）；

6) 加入與上清液等體積

7) 離心法沉淀DNA；

8) 在75%乙醇中漂洗DNA數(shù)分鐘以上，用Tip頭吸干乙醇；

9) 用1ml 75%乙醇再漂洗一次；

10) 沉淀于室溫或64℃以下的恒溫箱中干燥片刻至剛出現(xiàn)半透明，不要過(guò)度干燥；

11) 用50μlTE溶解沉淀，可用65℃水浴助溶，DNA粗提物可用于粗略PCR等。

利用高通量組織研磨儀對(duì)要進(jìn)行DNA提取的植物樣品研磨的好處在于：研磨過(guò)程中，不會(huì)對(duì)植物組織造成破壞，可根據(jù)需要選擇干磨、濕磨及冷凍研磨，封閉式的樣品管，避免樣品交叉污染。